※ [本文转录自 NTUmed91work 看板] 作者: ponyo (反省吧) 看板: NTUmed91work 标题: Re: [问题] 遗传实验的问题... 时间: Sun Jan 5 19:00:42 2003 ※ 引述《sammil (建造雨林)》之铭言： : ※ 引述《chanyang (数羊..数小太阳:*)》之铭言： : : Solution 1: 把细菌打散 : : Tris-Cl:缓冲液 : : EDTA:抓住2+ cation(2+ cation is a coenzyme) : : Solution 2:lyse the germs : : 0.2N NaOH: 将所有物质溶解 : : SDS:break cell membrane : : Solution 3: : : 5M potassium acetate:沉淀SDS 把 ***(?) (字太乱看不懂ㄌ) 请补充!! : ***(?)应该是使protein和lipid形成稳定的错合物 我们班的助教是说，钾离子会取代SDS中的钠离子 使SDS（不知被取代後还叫不叫SDS）容易沈淀 : : 冰醋酸:中和溶液 使大部分沉淀 except plasmid (中和NaOH) 加了solution2後细菌被打了许多洞，我们要的plasmid就会流出 但是较大的genomic DNA应该还留在菌体内 加入solution3把NaOH中和，把SDS除掉 还有接下来的离心除去菌体残渣（本来还有一步加phenol,chloroform以除去蛋白和脂质） 这样应该就很乾净了...除了plasmid应该只有一些RNA而已 -- 挖战壕捉蚯蚓奋勉向上更加向上 听枪声如溪流勤种地瓜也吃地瓜 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.csie.ntu.edu.tw) ◆ From: 218.184.29.151 -- 摇一柄桂桨，邀你温情河里泛舟 你可愿意？ 河是深了点，但那是思念溪汇成的河流 真爱沉不了 何况还有我深情的双眸相拥你左右 你还在忐忑？ --

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