作者cytospin (申請美國學校)
看板PhD
標題Re: [心得] 寫paper還是一整個痛苦
時間Fri Jan 23 11:09:07 2009
: luciferase的substrate是非常貴的!難怪你老闆不願意花錢
: 而且如果你的訊號不夠強,很容易會有false-negative的情形
: 比較省錢的方式是自己切histology,然後做幾個IHC...
: 經費充足一點,做laser capture,抽mRNA....
恩 不試他不願意花那個錢
而是因為我的藥物會modulate luciferase的表現
所以應該治療後因為腫瘤細胞要死光理論上luciferase construct也會較少
所以打老鼠substrate之後理論上訊號要低
但是藥物會turn on 那個基因造成luciferase反而升高
可是明明mass就減小了....所以造成false positive.....不能用
還好是我在知道別人有做過 我才沒有傻著跟著做:P
: : 還不含那些因為技術不佳 BM沒抽出來抽了一堆血的..(那是老闆自己抽的)...
: : 加上需要的Ab, bead分離系統
: : 我想比qPCR貴多了....
: 其實如果每次取的sample不多的話
: 有沒考慮乾脆把cDNA存起來,一次積多一點sample再run PCR?
因為很多是做biology, 要活著 讓細胞吐阿 哀嚎阿 在死亡邊緣掙扎阿
然後用很貴的東西測量嘔吐程度 還有逃跑程度
不然就是跑flow....等了十分鐘細胞還沒有幾顆....
恩.... 就是因為細胞少到不行 我都不喜歡做PCR,更別提western了
連flow我那時候都考慮做confocal or LSC
記得那時候pellet離下來 肉眼都要看不到了.....
不過 發明了這東西 真的會有人看嗎?? 結論就是,有錢比較重要....
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Ernest Chen, MBA/JD internaitonal editing service
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◆ From: 76.181.245.62
1F:推 SmileFace:cDNA是等你細胞哀嚎完才抽的,所以存起來沒差吧 01/23 11:12
2F:→ SmileFace:另外既然做Luc有實質上困難,那就不要想這個昂貴的實驗 01/23 11:13
3F:→ cytospin:有些實驗做完會屍骨無存 像是flow阿 01/23 11:25
4F:→ cytospin:阿 抱怨太多 反正老闆不會來 哈哈 01/23 11:52
5F:推 CarloL:萬一你變 PI, 你就會開始欣賞在垃圾裡揀出樣品的實驗... 01/24 01:31
6F:推 threestars:辛苦了 兩種工作一起燒的日子本來就很辛苦 01/24 17:25