作者cytospin (申请美国学校)
看板PhD
标题Re: [心得] 写paper还是一整个痛苦
时间Fri Jan 23 11:09:07 2009
: luciferase的substrate是非常贵的!难怪你老板不愿意花钱
: 而且如果你的讯号不够强,很容易会有false-negative的情形
: 比较省钱的方式是自己切histology,然後做几个IHC...
: 经费充足一点,做laser capture,抽mRNA....
恩 不试他不愿意花那个钱
而是因为我的药物会modulate luciferase的表现
所以应该治疗後因为肿瘤细胞要死光理论上luciferase construct也会较少
所以打老鼠substrate之後理论上讯号要低
但是药物会turn on 那个基因造成luciferase反而升高
可是明明mass就减小了....所以造成false positive.....不能用
还好是我在知道别人有做过 我才没有傻着跟着做:P
: : 还不含那些因为技术不佳 BM没抽出来抽了一堆血的..(那是老板自己抽的)...
: : 加上需要的Ab, bead分离系统
: : 我想比qPCR贵多了....
: 其实如果每次取的sample不多的话
: 有没考虑乾脆把cDNA存起来,一次积多一点sample再run PCR?
因为很多是做biology, 要活着 让细胞吐阿 哀嚎阿 在死亡边缘挣扎阿
然後用很贵的东西测量呕吐程度 还有逃跑程度
不然就是跑flow....等了十分钟细胞还没有几颗....
恩.... 就是因为细胞少到不行 我都不喜欢做PCR,更别提western了
连flow我那时候都考虑做confocal or LSC
记得那时候pellet离下来 肉眼都要看不到了.....
不过 发明了这东西 真的会有人看吗?? 结论就是,有钱比较重要....
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Ernest Chen, MBA/JD internaitonal editing service
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◆ From: 76.181.245.62
1F:推 SmileFace:cDNA是等你细胞哀嚎完才抽的,所以存起来没差吧 01/23 11:12
2F:→ SmileFace:另外既然做Luc有实质上困难,那就不要想这个昂贵的实验 01/23 11:13
3F:→ cytospin:有些实验做完会屍骨无存 像是flow阿 01/23 11:25
4F:→ cytospin:阿 抱怨太多 反正老板不会来 哈哈 01/23 11:52
5F:推 CarloL:万一你变 PI, 你就会开始欣赏在垃圾里拣出样品的实验... 01/24 01:31
6F:推 threestars:辛苦了 两种工作一起烧的日子本来就很辛苦 01/24 17:25