作者ling (zzZZ)
看板NTUmed89
標題生化實驗13/14/15組照過來..
時間Fri May 3 20:25:24 2002
今天我有兩個地方說錯了 真是對不起各位
首先
在照片最左邊的 marker namda phage+HindIII的
它最下面那一個 band 是 500bp的 而不是 125bp的
第二 今天我在解釋這三種 form DNA的時候 講解錯誤 真是對不起
a. plasmid DNA linear form 應該是在 4000bp左右 原因為:
namda phage DNA 經過限制酵素(HindIII)作用後 會被切成一段一段
所以是線性的DNA(linear form)
我們所抽出來的質體DNA(加上insert 應該是4100bp)
b.
open circular form 應該是在 8000左右那個band,但那個 band
也有可能是 兩個質體互相套在一起形成的tautemer,不曉得是這樣拼嗎?
故base pair變成兩倍..老師說 只要解釋有理就是對的...:P
c. supercoiled form 則是最下面那一個
那為什麼今天會看到那麼多band的原因是因為 EtBr 濃度較濃 所以
可以看到許多比較微量的片段 如果EtBr少一點 會比較容易觀察
d.
supercoiled form上面很靠近的地方還有一個band,而在linear form
上面也可以看到一個很近的band, 原因為 他們的link number.不一樣
如果不懂這段 請看講義或課本 或是來問我 :)
中間也有許多band那些有可能是其他不同 link number所造成的結果
第三
最左邊數來第三個是 control+PstI 就是只有 plasmid DNA + restriction
enzyme, 那可以切兩刀,所以切出一段insert(1.25kbp), 所以他的位置在
500bp--2000bp之間,那質體不一定會完全被切完,所以也會看到一些原本
該有的band,
真是對不起大家 說錯好多,
遜卡ling
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◆ From: 163.31.25.27
※ 編輯: ling 來自: 163.31.25.27 (05/03 20:30)