今天我有两个地方说错了 真是对不起各位 首先 在照片最左边的 marker namda phage+HindIII的 它最下面那一个 band 是 500bp的 而不是 125bp的 第二 今天我在解释这三种 form DNA的时候 讲解错误 真是对不起 a. plasmid DNA linear form 应该是在 4000bp左右 原因为: namda phage DNA 经过限制酵素(HindIII)作用後 会被切成一段一段 所以是线性的DNA(linear form) 我们所抽出来的质体DNA(加上insert 应该是4100bp) b. open circular form 应该是在 8000左右那个band,但那个 band 也有可能是 两个质体互相套在一起形成的tautemer,不晓得是这样拼吗? 故base pair变成两倍..老师说 只要解释有理就是对的...:P c. supercoiled form 则是最下面那一个 那为什麽今天会看到那麽多band的原因是因为 EtBr 浓度较浓 所以 可以看到许多比较微量的片段 如果EtBr少一点 会比较容易观察 d. supercoiled form上面很靠近的地方还有一个band,而在linear form 上面也可以看到一个很近的band, 原因为 他们的link number.不一样 如果不懂这段 请看讲义或课本 或是来问我 :) 中间也有许多band那些有可能是其他不同 link number所造成的结果 第三 最左边数来第三个是 control+PstI 就是只有 plasmid DNA + restriction enzyme, 那可以切两刀,所以切出一段insert(1.25kbp), 所以他的位置在 500bp--2000bp之间,那质体不一定会完全被切完,所以也会看到一些原本 该有的band, 真是对不起大家 说错好多, 逊卡ling --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 163.31.25.27 ※ 编辑: ling 来自: 163.31.25.27 (05/03 20:30)