作者eagleman ( )
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標題[問題] 正立螢光顯微鏡接雷射?
時間Tue May 27 21:35:24 2008
請問諸位版友
當你們在使用螢光顯微鏡時
有嘗試用Laser激發螢光粒子嗎
(我指的是直接用laser將樣本進行全域照亮
並激發其內之螢光粒子)
另外請問國內是否有貴儀中心有可供接雷射的螢光顯微鏡呢?
希望不吝指教
謝謝
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◆ From: 118.169.79.90
1F：推 Jinuse:我們實驗室有 不過是倒立式的TIRFM 正立式所上也有 05/27 21:37
2F：→ eagleman:那請問貴所的正立式顯微鏡旁邊有雷射可以直接打嗎 謝謝 05/27 21:38
3F：→ pinlittle:你是指lasr confocal嗎??我有點搞迷糊了.... 05/27 22:02
4F：→ pinlittle:laser confocal.... 05/27 22:03
5F：→ eagleman:由於我要記錄的是屬於動態影像 05/27 22:21
6F：→ eagleman:confocal受限於其掃瞄速度不夠快 05/27 22:21
7F：→ eagleman:故我希望改用CCD紀錄 05/27 22:22
8F：→ pinlittle:或許可以借epi-fluorescent microscope...一般作living 05/27 22:24
9F：→ pinlittle:cell image或是作GFP動態實驗的...都有螢光+高速CCD 05/27 22:25
10F：→ eagleman:請問有正立式的嗎 05/27 22:26
11F：→ pinlittle:你是因為試片因素才需要正立式的嗎?如果是...可是考慮把 05/27 22:27
12F：→ pinlittle:試片倒蓋...我曾經在矽晶片上養細胞做染色...我就把試 05/27 22:28
13F：→ pinlittle:片倒蓋....不然問一下做生物的朋友看tissue 染色的應該 05/27 22:28
14F：→ pinlittle:有正立式螢光顯微鏡....而且CCD"通常都不錯".... 05/27 22:29
15F：→ eagleman:我是在wafer上面做開放式結構 所以無法倒立 >"< 05/27 22:29
16F：→ eagleman:感謝P大 有問題我再請教您 麻煩您了 05/27 22:30
17F：→ pinlittle:你要看螢光還是平光....我覺得可以....多想一下顯微鏡 05/27 22:31
18F：→ pinlittle:的構造...而且正立平光也不見得可以透過晶片.. 05/27 22:32
19F：→ pinlittle:這是我比較擔心的一點.... 05/27 22:33
20F：→ eagleman:我是要用做流場觀測 即u-PIV 05/27 22:33
21F：→ eagleman:希望用螢光紀錄粒子影像觀測流場 05/27 22:34
22F：→ eagleman:所以必須先透過laser激發其中的螢光粒子 05/27 22:36
23F：→ pinlittle:基板能用玻璃嗎?還是就是要用矽去做...如果真要用矽 05/27 22:37
24F：→ pinlittle:找一下看tissue的螢光顯微鏡...然後接CCD..應該就有機會 05/27 22:37
25F：→ pinlittle:我前一陣子投了一篇文章...就是用流道量DNA的一些數據 05/27 22:38
26F：→ eagleman:所以說看tissue的顯微鏡通常有laser 05/27 22:39
27F：→ pinlittle:不過我基板是用玻璃...簡單許多...看螢光要小心bleach 05/27 22:39
28F：→ pinlittle:的問題.... 05/27 22:39
29F：→ eagleman:可以直接打在Sample上囉? 05/27 22:39
30F：→ eagleman:受限於最小線寬 所以可能無法用玻璃 05/27 22:40
31F：→ pinlittle:一般螢光顯微鏡都適用汞燈加濾片調到你要的波長...如果 05/27 22:40
32F：→ pinlittle:有laser...我只看過confocal系統有... 05/27 22:41
33F：→ eagleman:嗚 因為frame rate太高 所以只用汞燈亮度不夠 >"< 05/27 22:41
34F：→ eagleman:台大的confocal搭配正立式只有辦法記錄到20張/s 05/27 22:42
35F：→ pinlittle:試著把汞燈全開,可能要借可以catch低亮度的CCD.. 05/27 22:44
36F：→ pinlittle:光源是一個問題...我覺得可以用CCD彌補過來... 05/27 22:46
37F：→ pinlittle:像我們做動態細胞實驗...那個螢光幾乎弱到看不到 05/27 22:46
38F：→ pinlittle:頂級的CCD依舊的到.... 05/27 22:46
39F：→ pinlittle:再想想吧....你可以調低dye的濃度嗎.... 05/27 22:47
40F：→ eagleman:請問p大台灣有epi-fluorescent microscope嗎? 05/27 22:52
41F：→ pinlittle:嘿嘿...做生物的地方應該都有...我有看到CCD有35-40 05/27 22:54
42F：→ pinlittle:frames/sec...不過一台要三四萬美金... 05/27 22:54
43F：→ eagleman:CCD應該不是問題這個我們實驗室有一台可拍到800的 05/27 22:55
44F：→ eagleman:只是當這麼快的時候 光源就一定要夠亮 05/27 22:56
45F：→ eagleman:POWER可能需要到1瓦以上 05/27 22:56
46F：→ eagleman:感謝p大線索 我從epi-fluorescent microscope試試 05/27 22:58
47F：→ pinlittle:我不知道epi中文叫什麼...但問一下生物的人..看染色的 05/27 23:02
48F：→ pinlittle:應該都知道...接上CCD後,把汞燈全開...將所有濾片拿掉 05/27 23:03
49F：→ pinlittle:CCD盡量調敏感一點....多試幾次..應該就有機會... 05/27 23:03
50F：→ pinlittle:可能不是很打到你問題的靶....不過這是我目前能想到的. 05/27 23:04
51F：→ eagleman:總之感謝 有問題再請教 05/27 23:10
52F：推 Jinuse:我們所上正立式的有雷射 不過我怕他只會激發表面薄薄的一層 05/28 21:41
53F：→ Jinuse:因為他號稱是TIRFM CCD也是很好的 cooled CCD 參考一下 05/28 21:42
54F：推 Jeffch:小聲說：我們實驗室有..我們是Nikon80i+ Cooke sensicam qe 06/11 11:23