作者eagleman ( )
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标题[问题] 正立萤光显微镜接雷射?
时间Tue May 27 21:35:24 2008
请问诸位版友
当你们在使用萤光显微镜时
有尝试用Laser激发萤光粒子吗
(我指的是直接用laser将样本进行全域照亮
并激发其内之萤光粒子)
另外请问国内是否有贵仪中心有可供接雷射的萤光显微镜呢?
希望不吝指教
谢谢
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◆ From: 118.169.79.90
1F：推 Jinuse:我们实验室有 不过是倒立式的TIRFM 正立式所上也有 05/27 21:37
2F：→ eagleman:那请问贵所的正立式显微镜旁边有雷射可以直接打吗 谢谢 05/27 21:38
3F：→ pinlittle:你是指lasr confocal吗??我有点搞迷糊了.... 05/27 22:02
4F：→ pinlittle:laser confocal.... 05/27 22:03
5F：→ eagleman:由於我要记录的是属於动态影像 05/27 22:21
6F：→ eagleman:confocal受限於其扫瞄速度不够快 05/27 22:21
7F：→ eagleman:故我希望改用CCD纪录 05/27 22:22
8F：→ pinlittle:或许可以借epi-fluorescent microscope...一般作living 05/27 22:24
9F：→ pinlittle:cell image或是作GFP动态实验的...都有萤光+高速CCD 05/27 22:25
10F：→ eagleman:请问有正立式的吗 05/27 22:26
11F：→ pinlittle:你是因为试片因素才需要正立式的吗?如果是...可是考虑把 05/27 22:27
12F：→ pinlittle:试片倒盖...我曾经在矽晶片上养细胞做染色...我就把试 05/27 22:28
13F：→ pinlittle:片倒盖....不然问一下做生物的朋友看tissue 染色的应该 05/27 22:28
14F：→ pinlittle:有正立式萤光显微镜....而且CCD"通常都不错".... 05/27 22:29
15F：→ eagleman:我是在wafer上面做开放式结构 所以无法倒立 >"< 05/27 22:29
16F：→ eagleman:感谢P大 有问题我再请教您 麻烦您了 05/27 22:30
17F：→ pinlittle:你要看萤光还是平光....我觉得可以....多想一下显微镜 05/27 22:31
18F：→ pinlittle:的构造...而且正立平光也不见得可以透过晶片.. 05/27 22:32
19F：→ pinlittle:这是我比较担心的一点.... 05/27 22:33
20F：→ eagleman:我是要用做流场观测 即u-PIV 05/27 22:33
21F：→ eagleman:希望用萤光纪录粒子影像观测流场 05/27 22:34
22F：→ eagleman:所以必须先透过laser激发其中的萤光粒子 05/27 22:36
23F：→ pinlittle:基板能用玻璃吗?还是就是要用矽去做...如果真要用矽 05/27 22:37
24F：→ pinlittle:找一下看tissue的萤光显微镜...然後接CCD..应该就有机会 05/27 22:37
25F：→ pinlittle:我前一阵子投了一篇文章...就是用流道量DNA的一些数据 05/27 22:38
26F：→ eagleman:所以说看tissue的显微镜通常有laser 05/27 22:39
27F：→ pinlittle:不过我基板是用玻璃...简单许多...看萤光要小心bleach 05/27 22:39
28F：→ pinlittle:的问题.... 05/27 22:39
29F：→ eagleman:可以直接打在Sample上罗? 05/27 22:39
30F：→ eagleman:受限於最小线宽 所以可能无法用玻璃 05/27 22:40
31F：→ pinlittle:一般萤光显微镜都适用汞灯加滤片调到你要的波长...如果 05/27 22:40
32F：→ pinlittle:有laser...我只看过confocal系统有... 05/27 22:41
33F：→ eagleman:呜 因为frame rate太高 所以只用汞灯亮度不够 >"< 05/27 22:41
34F：→ eagleman:台大的confocal搭配正立式只有办法记录到20张/s 05/27 22:42
35F：→ pinlittle:试着把汞灯全开,可能要借可以catch低亮度的CCD.. 05/27 22:44
36F：→ pinlittle:光源是一个问题...我觉得可以用CCD弥补过来... 05/27 22:46
37F：→ pinlittle:像我们做动态细胞实验...那个萤光几乎弱到看不到 05/27 22:46
38F：→ pinlittle:顶级的CCD依旧的到.... 05/27 22:46
39F：→ pinlittle:再想想吧....你可以调低dye的浓度吗.... 05/27 22:47
40F：→ eagleman:请问p大台湾有epi-fluorescent microscope吗? 05/27 22:52
41F：→ pinlittle:嘿嘿...做生物的地方应该都有...我有看到CCD有35-40 05/27 22:54
42F：→ pinlittle:frames/sec...不过一台要三四万美金... 05/27 22:54
43F：→ eagleman:CCD应该不是问题这个我们实验室有一台可拍到800的 05/27 22:55
44F：→ eagleman:只是当这麽快的时候 光源就一定要够亮 05/27 22:56
45F：→ eagleman:POWER可能需要到1瓦以上 05/27 22:56
46F：→ eagleman:感谢p大线索 我从epi-fluorescent microscope试试 05/27 22:58
47F：→ pinlittle:我不知道epi中文叫什麽...但问一下生物的人..看染色的 05/27 23:02
48F：→ pinlittle:应该都知道...接上CCD後,把汞灯全开...将所有滤片拿掉 05/27 23:03
49F：→ pinlittle:CCD尽量调敏感一点....多试几次..应该就有机会... 05/27 23:03
50F：→ pinlittle:可能不是很打到你问题的靶....不过这是我目前能想到的. 05/27 23:04
51F：→ eagleman:总之感谢 有问题再请教 05/27 23:10
52F：推 Jinuse:我们所上正立式的有雷射 不过我怕他只会激发表面薄薄的一层 05/28 21:41
53F：→ Jinuse:因为他号称是TIRFM CCD也是很好的 cooled CCD 参考一下 05/28 21:42
54F：推 Jeffch:小声说：我们实验室有..我们是Nikon80i+ Cooke sensicam qe 06/11 11:23