http://151.fosu.edu.cn/syjwz/06ZZ/05bjzflypy/main/jzflypy3.htm 2.組織分離法 是利用子實體組織來分離獲得純菌絲的方法。食用菌的子實體實際上是菌 絲體的扭結物，具有很強的再生能力，通過菇體組織分離，培養純種，此種方法簡便，取 材廣泛，不易發生變異，又能保持種性，無論幼菇或成熟菇體，只要是新鮮的，均能分離 培養。 (1)香菇、平菇組織分離法 香菇、平菇組織分離時，首先應從出菇早、結菇均勻、 生長旺盛的菇木上或菌磚上，挑選發育正常，菇蕾長出不久，邊緣尚內卷，菇柄短壯，菇 蓋肥厚，無病蟲害的種菇作分離材料。 分離時，將采好的種菇用清水洗淨表面，然後帶入無菌室(箱)內，放入0.2%昇汞水或 75%的酒精內浸泡分鐘，取出用無菌水沖洗1～2次，用無菌紗布吸乾水漬，放入清潔的培 養皿內，用消毒過的小刀把菇蕾縱剖為二，在菇蓋與菇柄相接處的部分切取綠豆大小 菌 肉（圖4-10），移接在斜面培養基中央。 試管接種後放入25℃～27℃恆溫下培養2～3天，組織塊上就長出白色的菌絲，15天後 ，菌絲就可以長滿培養基斜面。再移接到新的培養基上培育成母種。 （2）黑木耳的組織分離法 由於黑木耳的耳瓣薄，並富有膠質，所以在過去的分離法 中很少採用耳片組織分離。其實採取組織分離法，操作容易，方法簡便，只要消毒操作嚴 格，分離極易成功。在自然氣溫下乾燥的，貯放期在6個月內的干種耳，分離後均能長出 菌絲體。 具體操作：先將干耳浸水6～8小時，然後用冷開水沖洗2～3次，再用清潔紗布或藥棉 吸乾漬水，帶入接種箱內，在無菌水中搖動4～5分鐘，取出用75%酒精擦洗表面，用無菌 水沖洗多次，再將耳片用無菌剪刀將四周邊緣去掉，切取0.lcm左右的組織塊，接種在試 管中部培養基邊壁上，以利長出菌絲，接種後放入28℃～300℃的恆溫下培養1～2天後， 就可看到白色絨毛狀菌絲，初期生長較慢，5～6天後生長迅速，1.5天左右就可長滿全管 。 (3)其它菌類組織分離法 草菇、猴頭、靈芝、茯苓等組織分離法操作程序和消毒方 法與香菇組織分離相似，培養溫度因種類不同各有差異。 草菇選擇外形端正、健壯肥大、包皮未破的菌蛋作分離材料，取菌柄與菌傘連接處的 組織，接到試管培養基後，放在30℃～33℃溫度下培養。 猴頭組織分離法首先應選肥大、幼嫩、刺短，生長健壯的子實體，然後用清水洗淨表 面，將外表菌刺削去後按香菇組織分離操作進行消毒，用無菌解剖刀在子實體上劃一條縫 用手沿縫掰開，挑起心部小塊組織移入斜面培養基中，置於20℃～22℃溫度下培養。靈芝 的組織分離也是取菌柄與菌蓋連接處的小塊組織，接種後的培養溫度在25℃左右。 茯苓是採用菌核分離，首先應選擇個體大而結實，生長旺盛，表面可見裂紋，顏色為 紫紅褐色，皮薄，肉色白，掰開後可見細小的乳白色或綠豆漿色的漿液，重達1.5kg以上 的鮮菌核作為分離材料，所取組織塊相對要大點。試管接好後,置於22℃的恆溫下培養。 為了防止菌種退化。最好各品種每年用組織分離重新分離一次，以確保菌種質量的優良。 3.寄主分離法 寄主分離法是從生長有菇耳的木材中獲得純種的一種方法，也叫種木 分離法。常用於黑木耳和銀耳的菌種分離。 (1)黑木耳的寄主分離法 黑木耳的耳木分離應在盛產子實體的季節進行。選擇經自 然孢子繁殖的，結耳多、耳片大、無雜菌和病蟲害的耳棒；或選擇人工接種在1～2年內出 耳，出耳旺盛，朵形大的耳棒做分離材料。 分離前，先把耳木晾乾，然後在黑木耳生長最好的部分，鋸取約2cm厚的小段，去掉 樹皮，放入0.1%昇汞水溶液或75%酒精內浸泡約1分鐘，取出用無菌水沖洗2～3次，再用無 菌紗布吸乾，放入墊了無菌紗布並已消過毒的小木板上，用滅過菌的利刀把木塊四壁劈去 ，再將種木切成半根火柴桿大的小條，截去兩頭，移接於斜面培養基上，置於22℃～25℃ 下培養2～3天，種木條上就可長出白色菌絲，再培養15天左右，菌絲就可長滿斜面。再從 中挑選菌絲粗壯、生長勢強、無雜菌、木耳菌絲特徵明顯的試管作栽培試驗，從中選出表 現最好的作為母種繁殖之用。 (2)銀耳的寄主分離法 銀耳的耳木分離法和黑木耳的耳木分離法基本相同。但更應 注意，切取長耳的中間部位，不取耳木兩端。因為兩端裸露在外，污染率高。將接好種的 試管放入23℃～25℃下培養，經2～3天後，在種木塊上就會長出白色纖細的菌絲，並延伸 到培養基上，約5天後培養基顏色變黃，隨著培養時間的延長，培養基的顏色逐漸加深至 黑色，並在培養基表面出現淺灰色斑紋的香灰菌絲。經7～10天後種木上出現白色短絨狀 菌絲，同時分泌白色或淡黃色水珠的銀耳發育菌絲。然後選取有發育菌絲的試管，分離擴 大，進行瓶栽或段木栽培試驗。 其他菌類如香菇、平菇、猴頭、靈芝、茯苓等，在沒有採摘到子實體的情況下，才採 用寄主分離法獲得母種。 --

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