http://151.fosu.edu.cn/syjwz/06ZZ/05bjzflypy/main/jzflypy3.htm 2.组织分离法 是利用子实体组织来分离获得纯菌丝的方法。食用菌的子实体实际上是菌 丝体的扭结物，具有很强的再生能力，通过菇体组织分离，培养纯种，此种方法简便，取 材广泛，不易发生变异，又能保持种性，无论幼菇或成熟菇体，只要是新鲜的，均能分离 培养。 (1)香菇、平菇组织分离法 香菇、平菇组织分离时，首先应从出菇早、结菇均匀、 生长旺盛的菇木上或菌砖上，挑选发育正常，菇蕾长出不久，边缘尚内卷，菇柄短壮，菇 盖肥厚，无病虫害的种菇作分离材料。 分离时，将采好的种菇用清水洗净表面，然後带入无菌室(箱)内，放入0.2%昇汞水或 75%的酒精内浸泡分钟，取出用无菌水冲洗1～2次，用无菌纱布吸乾水渍，放入清洁的培 养皿内，用消毒过的小刀把菇蕾纵剖为二，在菇盖与菇柄相接处的部分切取绿豆大小 菌 肉（图4-10），移接在斜面培养基中央。 试管接种後放入25℃～27℃恒温下培养2～3天，组织块上就长出白色的菌丝，15天後 ，菌丝就可以长满培养基斜面。再移接到新的培养基上培育成母种。 （2）黑木耳的组织分离法 由於黑木耳的耳瓣薄，并富有胶质，所以在过去的分离法 中很少采用耳片组织分离。其实采取组织分离法，操作容易，方法简便，只要消毒操作严 格，分离极易成功。在自然气温下乾燥的，贮放期在6个月内的干种耳，分离後均能长出 菌丝体。 具体操作：先将干耳浸水6～8小时，然後用冷开水冲洗2～3次，再用清洁纱布或药棉 吸乾渍水，带入接种箱内，在无菌水中摇动4～5分钟，取出用75%酒精擦洗表面，用无菌 水冲洗多次，再将耳片用无菌剪刀将四周边缘去掉，切取0.lcm左右的组织块，接种在试 管中部培养基边壁上，以利长出菌丝，接种後放入28℃～300℃的恒温下培养1～2天後， 就可看到白色绒毛状菌丝，初期生长较慢，5～6天後生长迅速，1.5天左右就可长满全管 。 (3)其它菌类组织分离法 草菇、猴头、灵芝、茯苓等组织分离法操作程序和消毒方 法与香菇组织分离相似，培养温度因种类不同各有差异。 草菇选择外形端正、健壮肥大、包皮未破的菌蛋作分离材料，取菌柄与菌伞连接处的 组织，接到试管培养基後，放在30℃～33℃温度下培养。 猴头组织分离法首先应选肥大、幼嫩、刺短，生长健壮的子实体，然後用清水洗净表 面，将外表菌刺削去後按香菇组织分离操作进行消毒，用无菌解剖刀在子实体上划一条缝 用手沿缝掰开，挑起心部小块组织移入斜面培养基中，置於20℃～22℃温度下培养。灵芝 的组织分离也是取菌柄与菌盖连接处的小块组织，接种後的培养温度在25℃左右。 茯苓是采用菌核分离，首先应选择个体大而结实，生长旺盛，表面可见裂纹，颜色为 紫红褐色，皮薄，肉色白，掰开後可见细小的乳白色或绿豆浆色的浆液，重达1.5kg以上 的鲜菌核作为分离材料，所取组织块相对要大点。试管接好後,置於22℃的恒温下培养。 为了防止菌种退化。最好各品种每年用组织分离重新分离一次，以确保菌种质量的优良。 3.寄主分离法 寄主分离法是从生长有菇耳的木材中获得纯种的一种方法，也叫种木 分离法。常用於黑木耳和银耳的菌种分离。 (1)黑木耳的寄主分离法 黑木耳的耳木分离应在盛产子实体的季节进行。选择经自 然孢子繁殖的，结耳多、耳片大、无杂菌和病虫害的耳棒；或选择人工接种在1～2年内出 耳，出耳旺盛，朵形大的耳棒做分离材料。 分离前，先把耳木晾乾，然後在黑木耳生长最好的部分，锯取约2cm厚的小段，去掉 树皮，放入0.1%昇汞水溶液或75%酒精内浸泡约1分钟，取出用无菌水冲洗2～3次，再用无 菌纱布吸乾，放入垫了无菌纱布并已消过毒的小木板上，用灭过菌的利刀把木块四壁劈去 ，再将种木切成半根火柴杆大的小条，截去两头，移接於斜面培养基上，置於22℃～25℃ 下培养2～3天，种木条上就可长出白色菌丝，再培养15天左右，菌丝就可长满斜面。再从 中挑选菌丝粗壮、生长势强、无杂菌、木耳菌丝特徵明显的试管作栽培试验，从中选出表 现最好的作为母种繁殖之用。 (2)银耳的寄主分离法 银耳的耳木分离法和黑木耳的耳木分离法基本相同。但更应 注意，切取长耳的中间部位，不取耳木两端。因为两端裸露在外，污染率高。将接好种的 试管放入23℃～25℃下培养，经2～3天後，在种木块上就会长出白色纤细的菌丝，并延伸 到培养基上，约5天後培养基颜色变黄，随着培养时间的延长，培养基的颜色逐渐加深至 黑色，并在培养基表面出现浅灰色斑纹的香灰菌丝。经7～10天後种木上出现白色短绒状 菌丝，同时分泌白色或淡黄色水珠的银耳发育菌丝。然後选取有发育菌丝的试管，分离扩 大，进行瓶栽或段木栽培试验。 其他菌类如香菇、平菇、猴头、灵芝、茯苓等，在没有采摘到子实体的情况下，才采 用寄主分离法获得母种。 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 124.8.149.52