http://etds.lib.ntu.edu.tw/etdservice/view_metadata?etdun=U0001-1707200622522000&from=DEPT&deptid=D0001007008 白木耳 (Tremella fuciformis Berk) 為重要食藥用菇類之一，本研究以白木耳乾燥子實 體為材料，經硫酸銨沈澱及 DE-52 陰離子交換管柱純化出具有免疫調節活性的蛋白區分 物 TFPs，進一步以 HiTrap Q 陰離子交換層析與膠體過濾層析將 TFPs 分離出兩個蛋白 ，分別命名為TFP1 與 TFP2，其分子量分別約為 24 kDa與 40 kDa，以等電聚焦電泳分析 發現兩者之 pI 值皆為 3.45。TFP1 和 TFP2 經過醣蛋白染色試驗後，發現兩者皆非醣蛋 白，經過血球凝集試驗後，發現兩者皆不具有凝集小鼠紅血球之活性。經過體外免疫活性 試驗發現白木耳蛋白 TFP1 與TFP2 均可直接活化 RAW264.7 巨噬細胞分泌 nitric oxide 與 TNF-α (p ＜ 0.05)，此外，TFP1 與 TFP2 也能夠刺激小鼠脾臟細胞增生，而 TFP1蛋白在100℃ 或 -80℃ 處理後皆能保持其刺激巨噬細胞分泌 NO 的免疫活性。此外 ，以細胞融合技術建立 3 株能夠辨識白木耳蛋白 TFPs 之單株抗體，有利於日後之純化 與檢測，以及進行相關的蛋白質體學之研究。另一方面以白木耳菌絲體為原料，根據 TFP1 蛋白 N 端胺基酸序列合成 TFP1 之 degenerate primers，嘗試以3’ 及5’ rapid amplification cDNA ends (RACE) 的方法針對 TFP1 進行 cDNA 選殖，但未取得 符合序列之基因；由二維電泳與西方轉漬分析發現用來做為原料基因選殖的菌絲體可能沒 有表現目標蛋白或表現量很低，遂使得選殖工作遭到困境。序列比對分析各選殖片段產物 後發現，白木耳菌絲體的基因可能與 Cryptococcus neoformans var. neoformans JEC21 的基因有高度相關性。綜合本研究結果得知，TFP1 與 TFP2 是白木耳中重要的免疫調節 活性物質，可提升宿主相關免疫反應，極具醫藥以及臨床發展之潛力。 --

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