http://etds.lib.ntu.edu.tw/etdservice/view_metadata?etdun=U0001-1707200622522000&from=DEPT&deptid=D0001007008 白木耳 (Tremella fuciformis Berk) 为重要食药用菇类之一，本研究以白木耳乾燥子实 体为材料，经硫酸铵沈淀及 DE-52 阴离子交换管柱纯化出具有免疫调节活性的蛋白区分 物 TFPs，进一步以 HiTrap Q 阴离子交换层析与胶体过滤层析将 TFPs 分离出两个蛋白 ，分别命名为TFP1 与 TFP2，其分子量分别约为 24 kDa与 40 kDa，以等电聚焦电泳分析 发现两者之 pI 值皆为 3.45。TFP1 和 TFP2 经过醣蛋白染色试验後，发现两者皆非醣蛋 白，经过血球凝集试验後，发现两者皆不具有凝集小鼠红血球之活性。经过体外免疫活性 试验发现白木耳蛋白 TFP1 与TFP2 均可直接活化 RAW264.7 巨噬细胞分泌 nitric oxide 与 TNF-α (p ＜ 0.05)，此外，TFP1 与 TFP2 也能够刺激小鼠脾脏细胞增生，而 TFP1蛋白在100℃ 或 -80℃ 处理後皆能保持其刺激巨噬细胞分泌 NO 的免疫活性。此外 ，以细胞融合技术建立 3 株能够辨识白木耳蛋白 TFPs 之单株抗体，有利於日後之纯化 与检测，以及进行相关的蛋白质体学之研究。另一方面以白木耳菌丝体为原料，根据 TFP1 蛋白 N 端胺基酸序列合成 TFP1 之 degenerate primers，尝试以3’ 及5’ rapid amplification cDNA ends (RACE) 的方法针对 TFP1 进行 cDNA 选殖，但未取得 符合序列之基因；由二维电泳与西方转渍分析发现用来做为原料基因选殖的菌丝体可能没 有表现目标蛋白或表现量很低，遂使得选殖工作遭到困境。序列比对分析各选殖片段产物 後发现，白木耳菌丝体的基因可能与 Cryptococcus neoformans var. neoformans JEC21 的基因有高度相关性。综合本研究结果得知，TFP1 与 TFP2 是白木耳中重要的免疫调节 活性物质，可提升宿主相关免疫反应，极具医药以及临床发展之潜力。 --

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