作者metalbi (真有趣)
看板Master_D
標題Re: [請益] [生化實]請問大家收蛋白質要作western …
時間Fri Nov 24 20:05:41 2006
※ 引述《aggaci (學鋼琴,左手怎麼那麼笨)》之銘言:
: ※ 引述《metalbi (真有趣)》之銘言:
: : 收蛋白的步驟用的buffer有哪些
: : 我的方法有兩種
: : ㄧ種是用sampling buffer
: : 另依種是除了sampling buffer以外還有lysis buffer
: : 請問這兩種萃取法有差嗎??
: : 因為我查了我們實驗室的lysis buffer的配方
: : 裡面竟然還有phosphatase inhibitor
: : 不知道是否會將蛋白質的phosphatase都抑制掉了
: : 這樣對於實驗結果會有差耶!!
: : 煩請大家解答
: sample buffer? lysis buffer?兩者不一樣功能吧?!
: phosphatase inhibitor加這個就是要將蛋白質的phosphatase都抑制掉
: 想想妳若是要做phospho-protein的話,沒加會如何
沒加的話 磷酸根都被phosphatase給殺掉 那麼會看不到p-protein的表現
但是
若某個phosphatase參與我想探討的pathway呢?因為有inhibitor所以把我想探討的
phosphatase給抑制了 造成整條pathway有問題
這樣也不對呀
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