作者metalbi (真有趣)
看板Master_D
标题Re: [请益] [生化实]请问大家收蛋白质要作western …
时间Fri Nov 24 20:05:41 2006
※ 引述《aggaci (学钢琴,左手怎麽那麽笨)》之铭言:
: ※ 引述《metalbi (真有趣)》之铭言:
: : 收蛋白的步骤用的buffer有哪些
: : 我的方法有两种
: : ㄧ种是用sampling buffer
: : 另依种是除了sampling buffer以外还有lysis buffer
: : 请问这两种萃取法有差吗??
: : 因为我查了我们实验室的lysis buffer的配方
: : 里面竟然还有phosphatase inhibitor
: : 不知道是否会将蛋白质的phosphatase都抑制掉了
: : 这样对於实验结果会有差耶!!
: : 烦请大家解答
: sample buffer? lysis buffer?两者不一样功能吧?!
: phosphatase inhibitor加这个就是要将蛋白质的phosphatase都抑制掉
: 想想你若是要做phospho-protein的话,没加会如何
没加的话 磷酸根都被phosphatase给杀掉 那麽会看不到p-protein的表现
但是
若某个phosphatase参与我想探讨的pathway呢?因为有inhibitor所以把我想探讨的
phosphatase给抑制了 造成整条pathway有问题
这样也不对呀
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