作者Cappello (帽子)
看板Chemistry
標題[實驗] 天然物分離純化的疑問
時間Mon Sep 24 17:02:01 2018
由於非化學專業
指導教授本身也不是做化學分析的
無奈被丟了一個天然物分析的題目
在實驗規劃上遇到了瓶頸
教授也給不出專業的建議
想請版上專業的人給予指點
題目的方向主要是利用細胞平台去分析某種植物(木本)水萃物的抗發炎成分
找出具活性的化合物
該水萃物的萃取方式是利用水煮過再進行過濾(由廠商製作提供，不願透漏植物資訊)
拿到水萃物後
首先先以0.22um過濾後
使用酒精沉澱分離粗多醣
酒精層和粗多醣層濃乾後回溶做細胞實驗發現酒精層具有抗發炎效果
接下來的流程是和另外一個做分析的教授(做多醣方面的)稍微討論構思出來的
水萃物使用HP-20以水及MeOH(25% 50% 75% 100%)沖提分fraction
以細胞實驗找出有抗發炎效果的fraction
之後打HPLC-MS/MS分析圖譜
由於自己對於分析只停留在一些基礎的認知而已
想請教一下：
1.天然物的成分相當複雜，查過一些paper看到一般沖提溶劑都是七八種以上的濃度在跑的
像這種只有五種沖提濃度真的可以有效分離嗎?
2.HP-20似乎常使用於多醣類的分離，想請問是否也可以拿來做為活性化合物的分離?
因為找文獻似乎都是用矽膠管柱或是LH-20作為天然物分離的，
想說是不是比HP-20更為適合?
感激不盡!!!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.98.220
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Chemistry/M.1537779724.A.EA1.html
1F：→ sisay: 1.看情況，不過還是以HPLC方式獲得較純的化合物 09/24 20:26
2F：→ sisay: 2.在MS分析前你怎麼會知道活性化合物是哪種類型 09/24 20:26
因為看很多天然物分析似乎都是先細分很多fraction才去跑HPLC-MS的，我在想只分五個fraction純化水萃物效果似乎不會太好...可能還是有很多種類的化合物在裡面
3F：→ tony15899: LH-20好像比較貴 09/24 20:45
了解，謝謝!
4F：→ weiwei00: 先粗純化找出有活性的fraction，如此可排除沒有活性的混 09/24 21:28
5F：→ weiwei00: 合物。 09/24 21:28
對，目前流程是這個樣子的，只是水萃物很複雜，教授又想要找到compound，在想說只做一次的fraction真的就可以了嗎
※ 編輯: Cappello (140.112.98.220), 09/25/2018 11:14:55
6F：→ tony15899: 分fraction> 有效 > 再細分 > 有效 > re... 09/25 11:16
7F：→ faniour: 鞥天然物就樓上講的那樣 09/25 11:18
8F：→ faniour: 再重複試洗的方法 09/25 11:19
9F：推 sisay: 不過基本上化學跟生理的切入點剛好完全顛倒 09/26 00:58
10F：→ sisay: 化學切入是先求純化再測活性 生理是先求有活性再結構鑒定 09/26 00:59
11F：→ sisay: 有共同指導是最省事 兩邊都學 09/26 01:00
主要是想要找到活性物質，不算是共同指導，做分析的老師只有給一些建議而已
12F：推 HPLC: 應該先跑全波看你的化合物是什麼類型，再決定用什麼管柱。 09/30 20:36
13F：→ HPLC: 就我的認知HP-20我去拿來做多酚類分塊，而且我會以10%做一 09/30 20:36
14F：→ HPLC: 個區塊。最後要看你的目的是什麼。LH-20我那一年500 g 5萬 09/30 20:36
15F：→ HPLC: 多，因為這個很貴，所以我這個通常都是在半自備型前面。 09/30 20:36
16F：→ HPLC: 分區段-》測活性，針對這個有活性的在做分離，天然物純化是 09/30 20:56
17F：→ HPLC: 個很耗神的，加油！ 09/30 20:56
謝謝H大的建議!!!我有查文獻似乎也有人使用HP20分離flavonoid以及一些phytochemical的樣子
18F：推 ted40905: 樓上ID正確 10/01 00:49
※ 編輯: Cappello (140.112.98.220), 10/09/2018 17:27:27