作者Cappello (帽子)
看板Chemistry
标题[实验] 天然物分离纯化的疑问
时间Mon Sep 24 17:02:01 2018
由於非化学专业
指导教授本身也不是做化学分析的
无奈被丢了一个天然物分析的题目
在实验规划上遇到了瓶颈
教授也给不出专业的建议
想请版上专业的人给予指点
题目的方向主要是利用细胞平台去分析某种植物(木本)水萃物的抗发炎成分
找出具活性的化合物
该水萃物的萃取方式是利用水煮过再进行过滤(由厂商制作提供，不愿透漏植物资讯)
拿到水萃物後
首先先以0.22um过滤後
使用酒精沉淀分离粗多醣
酒精层和粗多醣层浓乾後回溶做细胞实验发现酒精层具有抗发炎效果
接下来的流程是和另外一个做分析的教授(做多醣方面的)稍微讨论构思出来的
水萃物使用HP-20以水及MeOH(25% 50% 75% 100%)冲提分fraction
以细胞实验找出有抗发炎效果的fraction
之後打HPLC-MS/MS分析图谱
由於自己对於分析只停留在一些基础的认知而已
想请教一下：
1.天然物的成分相当复杂，查过一些paper看到一般冲提溶剂都是七八种以上的浓度在跑的
像这种只有五种冲提浓度真的可以有效分离吗?
2.HP-20似乎常使用於多醣类的分离，想请问是否也可以拿来做为活性化合物的分离?
因为找文献似乎都是用矽胶管柱或是LH-20作为天然物分离的，
想说是不是比HP-20更为适合?
感激不尽!!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 140.112.98.220
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Chemistry/M.1537779724.A.EA1.html
1F：→ sisay: 1.看情况，不过还是以HPLC方式获得较纯的化合物 09/24 20:26
2F：→ sisay: 2.在MS分析前你怎麽会知道活性化合物是哪种类型 09/24 20:26
因为看很多天然物分析似乎都是先细分很多fraction才去跑HPLC-MS的，我在想只分五个fraction纯化水萃物效果似乎不会太好...可能还是有很多种类的化合物在里面
3F：→ tony15899: LH-20好像比较贵 09/24 20:45
了解，谢谢!
4F：→ weiwei00: 先粗纯化找出有活性的fraction，如此可排除没有活性的混 09/24 21:28
5F：→ weiwei00: 合物。 09/24 21:28
对，目前流程是这个样子的，只是水萃物很复杂，教授又想要找到compound，在想说只做一次的fraction真的就可以了吗
※ 编辑: Cappello (140.112.98.220), 09/25/2018 11:14:55
6F：→ tony15899: 分fraction> 有效 > 再细分 > 有效 > re... 09/25 11:16
7F：→ faniour: 鞥天然物就楼上讲的那样 09/25 11:18
8F：→ faniour: 再重复试洗的方法 09/25 11:19
9F：推 sisay: 不过基本上化学跟生理的切入点刚好完全颠倒 09/26 00:58
10F：→ sisay: 化学切入是先求纯化再测活性 生理是先求有活性再结构鉴定 09/26 00:59
11F：→ sisay: 有共同指导是最省事 两边都学 09/26 01:00
主要是想要找到活性物质，不算是共同指导，做分析的老师只有给一些建议而已
12F：推 HPLC: 应该先跑全波看你的化合物是什麽类型，再决定用什麽管柱。 09/30 20:36
13F：→ HPLC: 就我的认知HP-20我去拿来做多酚类分块，而且我会以10%做一 09/30 20:36
14F：→ HPLC: 个区块。最後要看你的目的是什麽。LH-20我那一年500 g 5万 09/30 20:36
15F：→ HPLC: 多，因为这个很贵，所以我这个通常都是在半自备型前面。 09/30 20:36
16F：→ HPLC: 分区段-》测活性，针对这个有活性的在做分离，天然物纯化是 09/30 20:56
17F：→ HPLC: 个很耗神的，加油！ 09/30 20:56
谢谢H大的建议!!!我有查文献似乎也有人使用HP20分离flavonoid以及一些phytochemical的样子
18F：推 ted40905: 楼上ID正确 10/01 00:49
※ 编辑: Cappello (140.112.98.220), 10/09/2018 17:27:27