作者Telcontar (皮皮)
看板Chemistry
標題[學習] 總酚含量測定(分光光度計的使用方法)
時間Tue Mar 3 17:02:56 2015
小弟不知道是不是自己的操作過程錯了,
因為我是照別人跟我說的做,但小弟一直無法重現文獻的實驗結果
請各位幫我看看,謝謝
我是使用總酚含量的測定(Folin-Ciocalteu的試劑測定),先做檢量線
方法:配置不同濃度的沒食子酸(0~100μg/ml)各取30μl,
加入100μl 2N Folin試劑,接著加入2ml的水,
最後再加入1ml 20%碳酸鈉,放置兩小時後測定其在750nm的吸收度
分光光度計的方法他是跟我說:
blank(當背景):放入sample + 2ml的水 + 1ml 碳酸鈉 (歸零)
實驗組:放入sample + 100μl Folin試劑+2ml的水 + 1ml 碳酸鈉
請問小弟操作分光光度計有錯嗎?因為做出來的檢量線R^2=0.9993
但換算相對濃度的時候卻跟文獻不一致(差很大)
因為分光光度計他是口頭跟我說的,所以我也不知道我是不是做錯了,
還是背景要放甲醇(我是用甲醇配沒食子酸的)或去離子水歸零?
網路上似乎也沒有詳細的說明分光光度計的使用方式,如果有的話請告知我,謝謝
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1F:→ modsel: 做檢量線時有扣沒食子酸750mn的背景嗎? 03/16 18:47
2F:→ modsel: 如果檢量線有0ug/mL的話 是否有扣Folin試劑的背景? 03/16 18:49