作者Telcontar (皮皮)
看板Chemistry
标题[学习] 总酚含量测定(分光光度计的使用方法)
时间Tue Mar 3 17:02:56 2015
小弟不知道是不是自己的操作过程错了,
因为我是照别人跟我说的做,但小弟一直无法重现文献的实验结果
请各位帮我看看,谢谢
我是使用总酚含量的测定(Folin-Ciocalteu的试剂测定),先做检量线
方法:配置不同浓度的没食子酸(0~100μg/ml)各取30μl,
加入100μl 2N Folin试剂,接着加入2ml的水,
最後再加入1ml 20%碳酸钠,放置两小时後测定其在750nm的吸收度
分光光度计的方法他是跟我说:
blank(当背景):放入sample + 2ml的水 + 1ml 碳酸钠 (归零)
实验组:放入sample + 100μl Folin试剂+2ml的水 + 1ml 碳酸钠
请问小弟操作分光光度计有错吗?因为做出来的检量线R^2=0.9993
但换算相对浓度的时候却跟文献不一致(差很大)
因为分光光度计他是口头跟我说的,所以我也不知道我是不是做错了,
还是背景要放甲醇(我是用甲醇配没食子酸的)或去离子水归零?
网路上似乎也没有详细的说明分光光度计的使用方式,如果有的话请告知我,谢谢
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1F:→ modsel: 做检量线时有扣没食子酸750mn的背景吗? 03/16 18:47
2F:→ modsel: 如果检量线有0ug/mL的话 是否有扣Folin试剂的背景? 03/16 18:49