作者s033591 (...)
看板Chemistry
標題[請益]用HPLC分析咖啡因
時間Sun Apr 27 00:13:50 2008
因為最近做了一個實驗用HPLC去分析咖啡因
其中,按照步驟甲醇和水做為mobile phase
另外還要添加醋酸及醋酸鈉把pH值調成3.5
不知道最後這個步驟的原因是啥?? 煩請大家幫忙
自己是有去網路上搜
http://abrc.sinica.edu.tw/upload/post/20070725120047.pdf
PDF前面幾張有講到pH值對band的影響
不知道跟這個有無關係??
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 221.169.231.196
1F：推 yhy:應該是為了防止caffein解離 解離後會拖尾 04/27 00:17
2F：→ sisay:喔~ 酸拖的可兇了 XD 不過大部份配水好像都會用buffer 04/27 01:25
3F：→ sisay:我之前沒有配buffer所以出來也都拖尾orz 04/27 01:27
4F：→ cleveland:有沒有可能是因為column的關係？ 04/27 15:45
5F：→ cleveland:譬如silica column在酸中較穩定 04/27 15:46
6F：→ epiphone0226:讓咖啡因的carboxylic acid不解離~不帶電 04/28 10:48
7F：→ epiphone0226:就不會跟固定相會有nonspcific ionic interaction 04/28 10:49
8F：→ epiphone0226:HPLC的書裡面都寫的很詳細喔~如果要用到HPLC 04/28 10:50
9F：→ epiphone0226:建議去找一下這類的書看一下會比較好 04/28 10:51
10F：→ epiphone0226:調到3.5跟咖啡因carboxylic acid 的pKa有關係 04/28 10:51
11F：→ epiphone0226:所以如果是分離胺基酸pH會調到2.4的意思是一樣的 04/28 10:52
12F：→ epiphone0226:ionic interaction 算是非共價鍵裡面比較強的 04/28 10:54
13F：→ epiphone0226:所以要去除這個因素~這樣有解決到您的問題嗎? 04/28 10:55
14F：→ epiphone0226:所以調到3.5就是不讓咖啡因解離帶負電 04/28 11:00
15F：→ s033591:感謝大家的回答... 04/28 23:37