作者xum151 (為了夢想 衝吧)
看板Chemistry
標題[實驗] 分離peptide
時間Sun Dec 23 23:35:26 2007
恩
各位大大 小弟再實驗上目前遇到了一個問題 想問問看有沒有比較好的方法可以分離
就是 我手邊有一段peptide的序列 spehgpvvvhcsag。我讓其根Glutathione(GSH)反應,
spehgpvvvhcsag的cysteine上就會被接上GSH,是以雙硫鍵的方式鍵結。 然後當我反應
發現,還是會有沒有反應的spehgpvvvhcsag存在。 我是著用HPLC進行分離,然後column
是用c18,在我調了很多gradient之後,把所分出來的fraction送去做質量的確認,發現
我的產物跟反應物還是在同ㄧ根HPLC的peak中。 因為我需要去做抗體,所以希望產物
可以很純。 不過 以現在這個狀況看來, 還有一段不小的差距。 我有點想試試看
離子交換的column,不過不知道 差一個charge 分不分的開。 我有點擔心,就是peptide
本身的interaciton 會大於charge的difference. 希望板上的各位高手
可以給我ㄧ點建議 謝謝
頭痛欲裂的研究生
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不相信自己的人
根本就沒有努力做事的價值
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◆ From: 122.126.62.181
1F:推 puh1005:你的peptide大約1500~2000Da吧, 加了GSH大概多300 12/25 09:43
2F:→ puh1005:particle size較小的Gel filtration應該分得開哦 12/25 09:49
3F:→ xum151:謝謝你啦 12/25 23:20