作者xum151 (为了梦想 冲吧)
看板Chemistry
标题[实验] 分离peptide
时间Sun Dec 23 23:35:26 2007
恩
各位大大 小弟再实验上目前遇到了一个问题 想问问看有没有比较好的方法可以分离
就是 我手边有一段peptide的序列 spehgpvvvhcsag。我让其根Glutathione(GSH)反应,
spehgpvvvhcsag的cysteine上就会被接上GSH,是以双硫键的方式键结。 然後当我反应
发现,还是会有没有反应的spehgpvvvhcsag存在。 我是着用HPLC进行分离,然後column
是用c18,在我调了很多gradient之後,把所分出来的fraction送去做质量的确认,发现
我的产物跟反应物还是在同ㄧ根HPLC的peak中。 因为我需要去做抗体,所以希望产物
可以很纯。 不过 以现在这个状况看来, 还有一段不小的差距。 我有点想试试看
离子交换的column,不过不知道 差一个charge 分不分的开。 我有点担心,就是peptide
本身的interaciton 会大於charge的difference. 希望板上的各位高手
可以给我ㄧ点建议 谢谢
头痛欲裂的研究生
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不相信自己的人
根本就没有努力做事的价值
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 122.126.62.181
1F:推 puh1005:你的peptide大约1500~2000Da吧, 加了GSH大概多300 12/25 09:43
2F:→ puh1005:particle size较小的Gel filtration应该分得开哦 12/25 09:49
3F:→ xum151:谢谢你啦 12/25 23:20