作者Renina (貓尼醬)
看板Biotech
標題[討論] RNA純化疑問
時間Tue May 24 18:27:50 2022
各位前輩好,不好意思勞煩各位替小女子解惑
在RNA純化的實驗上,有些疑惑
關於均質時使用的Trizol、 Trisure試劑
與幫助層析的Chloroform 、BCP試劑的作用體積
本實驗室舊的 protocol是標注
sample加0.5mL的Trisure+0.05mL的BCP
但新的技術指導者傳授的protocol為
0.5mL的Trizol即加入0.15mL的chloroform
備註:其他前輩的protocol我都有參閱過,先不論Trisure Trizol。我亦有在其他人的proto
col看到 加入0.25mL Trisure 配上0.1mL 的BCP
勞煩前輩回覆問題 著重在比例而非材料來源
謝謝
----
Sent from
BePTT on my iPhone 8
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 163.15.178.40 (臺灣)
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1653388072.A.256.html
1F:推 leptoneta: 用不同的材料 當然比例不一樣05/24 19:50
2F:→ Renina: 一樓妳好 我有參照其他protocol05/24 19:51
3F:→ Renina: 無論材料問題05/24 19:51
4F:→ Renina: 其比例都不一致05/24 19:51
※ 編輯: Renina (163.15.178.40 臺灣), 05/24/2022 19:53:40
5F:→ blence: 不管是Trizol或Trisure,原廠的說明來看,內文比例都不對 05/24 19:58
6F:推 leptoneta: 通常Tri:BCP是10:1 或Tri:氯仿是10:2 05/24 20:11
7F:→ Renina: 在此感謝以上三位的協助,感激不盡 05/24 21:54
8F:→ Renina: 若其他版友/前輩有想補充的部分,也歡迎您們指點,謝謝 05/24 21:54
9F:推 chungrew: 材料明顯是變因 05/25 03:00
10F:推 dubius: 我的lab用10:1或是10:2 不論bcp 或chloroform我測試過並 05/26 20:41
11F:→ dubius: 未有太大差別 05/26 20:41
12F:→ dubius: 你也可以測試一下自己的系統 05/26 20:41
13F:→ dubius: 有時候某些protocol是為了節省 而非獲得最佳結果 05/26 20:42
14F:→ Renina: 感謝前輩指導 05/27 00:22
15F:→ untilnow: 重點在測試自己的系統,別人的食譜不見得適合自己 05/30 11:48