作者pent (有人試我的密碼,幹)
看板Biotech
標題[求救] 單點突變的mouse genotyping
時間Fri Aug 20 11:10:55 2021
以前只做過有插入tag或是Knock-out的mouse genotyping,
現在工作上有老鼠
只在單一個nucleotide做point mutation(A/C or T/G),
實驗室以前都是做出來送sanger,
不知道板上的各位有沒有啥方法
可以降低成本,能不能只跑膠或是real-time PCR的方式
就能分出genotype?
Thanks
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 39.13.3.70 (臺灣)
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※ 編輯: pent (39.13.3.70 臺灣), 08/20/2021 11:11:21
1F:→ blence: Taqman,自己設計primer跟probe,分別標FAM跟VIC或HEX 08/20 11:58
2F:→ blence: 如果是已知的位點或許Thermo會有set,不過老鼠的機率不大 08/20 12:00
3F:推 jabari: HRM 08/20 14:01
4F:→ ganbaba: 看有沒有新增酵素切位囉,有的話就PCR 切酵素 跑膠 08/20 15:13
5F:→ xxtomnyxx: 你搜尋「SNP genotyping」就有了,用LNA做probe準確度 08/20 18:47
6F:→ xxtomnyxx: 很高 08/20 18:47
7F:推 osla30: Mutagenically separated polymerase chain reaction (M 08/24 20:04
8F:→ osla30: S-PCR) 08/24 20:04
9F:→ osla30: 跑膠就能分,只是膠的%數2%以上比較好 08/24 20:07