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各位前輩大大好, 小妹我最近需要做一個加藥的細胞實驗,但由於我化學濃度的計算真的很弱…, 試著在網 路上看計算公式算,但花了半天的時間我還是不會QQ 所以希望有人能幫忙,如果能附上計算公式就更好了, 感激不盡!! (我好想搞懂這些濃度 間的計算/換算阿….) 實驗敘述: 需將兩個藥物加入養在35mm dish裡的細胞(是suspension cell), dish裡面會有 2ml的 medium A. 藥物一是Estradiol且最後的作用濃度需為0.1nM。分子量是272.38, 我有250mg, data sheet 上的敘述是說先用ethanol配置出20 μg/ml stock solution。可是該如何計 算與配製這個藥物,最後加入細胞後才會是0.1nM的作用濃度? B. 藥物二是 estrogen receptors的抑制劑, 最後的作用需 為濃度10^?-7 μM。分子量 是 387.51, 我有5mg, 也是會溶於ethanol。也是同樣的問題,我該如何配製, 最後加入細胞 後才會是10^?-7 μM作用濃度? 先謝謝各位前輩大大了! 預祝端午佳節愉快! --



※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 92.32.8.181 (瑞典)
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1559752481.A.CFA.html
1F:→ xxtomnyxx: 第一個藥應該不是直接配成你的 stock,濃度差太多06/06 01:19
2F:→ xxtomnyxx: 摩爾濃度 (M) = mole/L,1 M 的溶液如果有 1 L,裡面06/06 01:20
3F:→ xxtomnyxx: 就有 1 mole 的溶質;重量百分濃度應該不用解釋吧?06/06 01:21
謝謝解釋^_^
4F:→ xxtomnyxx: 分子量的定義是 1 mole 的該物質會有幾 g 重。06/06 01:22
5F:→ xxtomnyxx: 如果照你所說第一個藥先配成 20 μg/mL,你要用 12.5 L06/06 01:24
6F:→ xxtomnyxx: 的酒精去配,實驗室不會幹這種蠢事.......06/06 01:24
Data sheet 上面是說,用1ml 酒精與1mg的藥物一溶,再加入49 ml medium 配成 stock 。如果stock是20ug/ml,我該如何操作加藥才能是最後的0.1nM作用濃度呢 @@
7F:→ xxtomnyxx: 建議你去查一下第一個藥對酒精的最大溶解度,比較可能06/06 01:25
8F:→ xxtomnyxx: 的配法是先配成幾 mL 可能是 10~100 mg/mL 的保存溶液06/06 01:26
9F:→ xxtomnyxx: ,再取出部分稀釋成 20 μg/mL 並分裝保存。06/06 01:26
10F:→ xxtomnyxx: 瑞典!?06/06 01:30
對 遠在瑞典的求救@@ ※ 編輯: momo2355115 (92.32.8.181 瑞典), 06/06/2019 02:41:08
11F:推 tynse71864: 第一個酒精是2.5mg/ml , dmso 則是 20mg/ml ; 看是否06/06 08:47
12F:→ tynse71864: 溶在 DMSO中會比較好處理06/06 08:47
13F:推 tynse71864: 若是 DMSO 飽和濃度相當于 20/272.34/1= 0.0734M (有06/06 08:51
14F:→ tynse71864: 錯樓下請救我)06/06 08:51
15F:→ raiyu: 我有個小小疑問 酒精會揮發這樣的stock濃度準嗎??06/06 16:36
16F:→ raiyu: 因為我是習慣用DMSO溶的06/06 16:37
17F:→ raiyu: 我的習慣是將藥配成final濃度的1000x 加藥時直接1000x稀釋 06/06 16:50
18F:→ raiyu: 所以dish裡2ml 就加2μl的藥 06/06 16:52
19F:→ raiyu: 依照你目前的條件 A藥 1.先算出20μg/ml(20μg,1ml)是多少M06/06 16:53
20F:→ raiyu: 然後再把它調成0.1uM,然後加藥時2ml加2ul,final就會是 06/06 16:56
21F:→ raiyu: 0.1nM06/06 16:56
22F:→ raiyu: B藥也是照這邏輯配 06/06 16:58
23F:→ raiyu: 只是我的小疑問酒精揮發及medium配的保存上會不會容易汙染?06/06 17:00
24F:→ raiyu: 如果是我的話會直接用DMSO配成10mM的stock,要用的時候再106/06 17:14
25F:→ raiyu: 0x連續稀釋到0.1uM06/06 17:14
26F:→ raiyu: (有錯的話請小力鞭) 06/06 17:15
27F:→ blence: 放-20不怕酒精揮發,加到medium後,更不擔心揮發了 06/06 18:42
28F:→ blence: E2我是配成10mM與10uM的stock,用之前在外加入medium 06/06 18:44
29F:→ raiyu: 感謝樓上(?)答覆06/06 19:02
謝謝大家的答覆、協助與解釋!! 最後我的確是用酒精配置E2,stock儲存在-20.,再同大家所說的連續稀釋! 謝謝大家,祝福各位前輩的實驗超級順利:D ※ 編輯: momo2355115 (94.234.36.154 瑞典), 06/13/2019 02:00:17







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