作者linotox (linotox_992)
看板Biotech
標題293T 細胞養法
時間Mon Aug 13 13:23:54 2018
最近老闆跟別人要了一罐293T要我養
在網上搜尋到相關資訊
培養基 DMEM+10%FBS
繼代的話用 trypsin 將細胞打下來
這個細胞容易飄跟結塊
我看ATCC上寫加trypsin後不可以搖動敲擊
放在培養箱裡培養之後
拿出來要先加medium才能打不然會結塊
網上又有搜尋到不能讓他長滿大概八分滿
除了這些還有什麼需要注意的嗎><
—-
對了我在網上搜尋相關養法的時候看到的簡體字網站比較多欸..這是正常的嗎?
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.126.102.23
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1534137836.A.F53.html
1F:推 tynse71864: PBS不要沖太大力 08/13 15:45
2F:推 MeiAC: 我都直接用PBS沖下來,不會另外用trypsin打下來 08/13 19:52
3F:推 LaiTzS: 放心 這株怎麼養都不會死的 08/13 20:00
4F:→ Ianthegood: 奇怪 我找是英文比較多耶 之前養這隻的助理說這個丟進 08/13 23:09
5F:→ Ianthegood: 垃圾桶都會長 08/13 23:09
6F:→ grox: ATCC都會寫超詳細啊 大家有沒有follow就是另一回事XDD 08/14 00:10
7F:→ grox: 這株cell line很好養 搖動敲擊那邊應該沒差 但要加medium打 08/14 00:11
8F:→ grox: 以終止trypsin activity沒錯 08/14 00:11
9F:→ a90648: google 239T culture->英文為主 293T 培養->簡體字一堆 08/14 10:02
10F:推 Nicoleching: 用versene就好了,不用用到trypsin 08/14 19:57
11F:推 twnndnpdnc: 我們實驗室是用citric saline讓細胞下來,我有同學直 08/15 12:59
12F:→ twnndnpdnc: 接拿新的培養液暴力衝下來,都沒死 08/15 12:59
13F:推 wanderchang: 這株養就對了 08/15 13:53
14F:→ xxtomnyxx: 還是得說一句,雖然這株幾乎細胞隨便養medium隨便餵都 08/15 16:20
15F:→ xxtomnyxx: 能活,但是養的不好還是會影響細胞增殖速度和transfect 08/15 16:21
16F:→ xxtomnyxx: 效率。 08/15 16:21
17F:推 wanderchang: 推樓上,養得活只是最低標準,有沒有得到想要的 08/16 15:27
18F:→ wanderchang: 效果,還是要自己檢測 08/16 15:27
19F:→ wanderchang: 所謂養就對了只是給beginner的信心,不是指隨便喔 08/16 15:29
20F:推 a0976134: 養了一年的過來人跟您分享..這株細胞很好養,但貼附能 08/18 13:46
21F:→ a0976134: 力確實比其他癌細胞來的弱。 08/18 13:46
22F:→ a0976134: 基本上DPBS沖洗大力一點就下來了,但還是建議用Trypsi 08/18 13:46
23F:→ a0976134: n讓細胞分離比較好,處理時間不用1分鐘。剩下的就照一 08/18 13:46
24F:→ a0976134: 般培養細胞的方式就好。以10倍稀釋下去養,三天滿盤不 08/18 13:46
25F:→ a0976134: 是問題。 08/18 13:46
26F:→ a0976134: 如果你是要用這株細胞做實驗,加藥品的力道跟時間都是 08/18 13:48
27F:→ a0976134: 考慮因素,不然絕對飄起來給你看。 08/18 13:48
28F:推 rbcajyh: 細胞很小顆,種的時候可以種多一點 08/18 20:59
29F:推 tynse71864: 樓上,可是他長很快阿 QAO 08/18 22:34
30F:→ over999: 293t隨便養都活 08/20 16:20
31F:→ over999: 繼代也懶得拿酵素 直接medium沖一沖再離掉就好 08/20 16:21
32F:→ over999: 別爆盤都沒事 08/20 16:21
33F:推 mtcoat: medium沖比用trypsin好 trypsin作用要在一分鐘內終止反應 08/23 11:22
34F:→ mtcoat: 要不然很容易掛 08/23 11:22
35F:推 yrj0372: Trypsin加進去晃一圈後吸掉,再用medium把細胞沖下來 08/24 09:50