作者kaofei (phoebe)
看板Biotech
標題[求救] 有人將ligation mix不小心凍去-20過嗎
時間Wed Oct 4 21:49:05 2017
如題
我其實是想放4度的，但那時候腦袋轉太快在思考之後chloroform extract的流程，就不
小心把mix放去-20了……
一個小時後想想不對趕快拿出來，但已經結凍了QQ
之後解凍了tapping一下才放去4度
不知道這樣的意外對ligation效率的影響多大
稍微思考過，覺得也許不會到很災難, T4 應該不會因此去活，buffer也不會壞掉
比較怕DNA斷掉或ATP量下降之類的
但當然還是要等明天跑膠或downstream application一run才知道
我知道像我這樣腦殘不容易…但還是想問問有沒有人有類似經驗的
謝謝orz
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1F：→ blence: 不管是ligase,buffer,ATP,DNA,分開放時哪個你不是放-20? 10/04 22:02
2F：→ kaofei: 我也是這樣想的…，但實在是沒發生過類似的事所以有點緊張 10/04 22:12
3F：→ kaofei: orz 10/04 22:12
4F：→ chldoug: 但是ligase在-20度的時候不會結凍，配完mix再凍會變性啊 10/05 09:36
5F：→ turtle24: 加了酵素不立刻上機？ 10/05 14:13
6F：→ kaofei: 我放4度作用，都直接丟冷藏…只是那時候想太快以為自己要c 10/05 20:29
7F：→ kaofei: hloroform extraction了…就進-20了 10/05 20:29
8F：→ huuban: 然後結果呢~有接上嗎? 10/05 23:36
9F：→ kaofei: 有耶 好像影響不大，覺得走運… 10/06 15:13