作者xy234786 (阿亮)
看板Biotech
標題[求救] 跑膠band彎彎的
時間Thu Sep 14 13:59:40 2017
https://i.imgur.com/XxZYzHY.jpg
這是我western圖，不知道為何有些band會歪掉，不是一條直線，是跟跑膠時的電壓有關
嗎？我是上膠60V，下膠100V在跑，transfer200V一個小時。
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1F：→ bj59420: 跑的時候裡面可能有漏buffer? 09/15 12:17
2F：推 rbcajyh: 左右是不是有空一格well沒有load東西？這樣很容易沒有平 09/15 15:51
3F：→ rbcajyh: 衡band歪掉 09/15 15:51
4F：→ xy234786: 不過我有八個sample加marker，用大的齒梳，會無法避免 09/15 21:45
5F：→ xy234786: 用到旁邊的well 09/15 21:45
6F：推 iyorain: 下面膠感覺融了 transfer100v80分鐘試試 09/15 23:16
7F：推 twnndnpdnc: 冰寶有換嗎？ 09/16 23:12
8F：→ xy234786: 我沒試過100V 80min transfer效果好嗎？ 會不會tran不過 09/17 23:41
9F：→ xy234786: 去 09/17 23:41
10F：→ xy234786: lab的冰寶是都沒有換 因為也沒其他的qq 每次tran完是都 09/17 23:43
11F：→ xy234786: 滿燙的 所以主因可能就是過熱嗎？ 我是都埋在冰裡tran.. 09/17 23:43
12F：→ xy234786: . 09/17 23:43
13F：推 joseph103331: 這麼小不會過不去的，我們都用94V而已，100kDa也是 09/18 03:08
14F：→ joseph103331: 1h就過(10% gel)，高趴數的膠要久一點。 09/18 03:08
15F：→ xy234786: 我的是18%膠 建議用多久呢 09/18 22:00
16F：→ aj1139: sample夠用的話，而你又想跑漂亮，給你一些自己troublesh 09/19 07:28
17F：→ aj1139: oot的方法。同時跑兩片膠，跑完之後看ladder有沒有跑好看 09/19 07:28
18F：→ aj1139: ，選一片好的做WB，另一片染CBR相互對照。有懷疑步驟中的 09/19 07:28
19F：→ aj1139: 細節就一次改一個條件去抓。另外，transfer buffer不要。 09/19 07:28
20F：→ aj1139: reuse，不然只會越跑越慢、越跑越燙。 09/19 07:28
21F：→ aj1139: 順帶一提，你transfer的電壓不太可能上得去200V，如果硬 09/19 07:30
22F：→ aj1139: 催上去，膠應該也融化了吧 09/19 07:30
23F：推 westernblot5: 溫度太高也有可能 我們會埋在冰裡面再拿去4度冰箱 09/05 22:35
24F：→ westernblot5: 裡面跑 我們機器統一是在4度裡面 09/05 22:35