作者xy234786 (阿亮)
看板Biotech
標題[求救] 如何更清楚分出band
時間Fri Sep 1 23:43:21 2017
如圖，我想要分出21 ,19 , 22kda之蛋白，我用的條件是上膠4%膠(30V)，下膠16%(30mA)
，使用的buffer有分陰陽極，因為參考一篇paper tricine gel的配方去跑的，跑的有點
醜，只看到兩條，若想看到第三條，可以怎麼改良呢？
http://i.imgur.com/8OpBddN.jpg
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1F：→ Ianthegood: 更高的% 09/01 23:57
2F：→ milkpa: 更低的A/V，略低的蛋白質濃度，well的大小 09/02 10:47
3F：推 joseph103331: 用低溫去跑 設備允許可以試試用更長的膠跑 09/02 22:21
4F：→ blence: 這圖完全不像16% protein ladder該有的樣子,這gel不是沒跑 09/02 23:38
5F：→ blence: 開到底,就是配製有誤或非鮮配;可以google survivin圖參考 09/02 23:42
6F：→ blence: 前面#1PUWW0Kx提到用12%跑,還比這篇的ladder拉得更開 09/02 23:57
7F：→ xy234786: survivin? 09/03 10:50
8F：→ jsi: 樓樓上在說啥? 09/03 22:24
9F：→ Ianthegood: isotype吧 09/03 22:36
10F：推 joseph103331: 真的是survivin，是一種抗凋亡蛋白質(是說名字就很 09/04 01:31
11F：→ joseph103331: 有這種感覺了) 09/04 01:31
12F：→ joseph103331: 大小剛好是本文提到的，所以應該有很高的參考價值 09/04 01:32
14F：→ xy234786: 我翻了實驗室之前的論文，大概就要做到這樣 09/05 00:27
15F：→ aj1139: 雖然本文是問怎麼把band跑開，但看到之前的data，我建議 09/05 07:09
16F：→ aj1139: 不要用SDS-PAGE，這三個多肽太接近了。跑個液相層析之後 09/05 07:09
17F：→ aj1139: 送去打mass比較好。 09/05 07:09
18F：推 uouim: 推薦用12% Bis-Tris 的預製膠搭配 MOPS buffer。 09/10 23:56
19F：推 jockersung: 16或20%膠試試 然後設60-80V慢慢跑看看 09/18 21:08