作者libidoor (Anti de Sitter)
看板Biotech
標題[討論] westernblot running gel band 歪斜
時間Tue Aug 22 06:05:06 2017
如題，爬文找資料以後，
覺得還是不清楚問題出在哪裡。
最近 band 在靠近 gel 兩側的地方常常往上翹約30-45度。以下是我的條件，還請板上同
仁請教:
Running buffer: 沒用過，三週前泡的。
Voltage: 不管是 60 80 110 跑完全程都一樣（110有先用低電壓跑過線）會歪斜。
Gel: Bio-Rad commercialized protein gel. 都是用新買不到一周。
Sample: 體積固定為 10 或 20 ul， marker 分別為 7 或 14 ul. （之前跑10， 20 或
40 ，marker分別為 7 或14，都沒有問題。最近想說歪掉了才調整成10ul，但還是有問題
）
有額外發現到的是最近金屬線冒泡比以前多一些，以前80 volt看不太到冒泡，最近80就
像以前120一樣冒很多。
不知道以上環節是否哪裡最有可能導致 band 歪掉? 還是有其他原因?
謝謝大家!
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簽名檔
你和那些反年改團體
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1F：→ Ianthegood: 就不要跑最邊邊兩個lane啊 08/22 07:25
2F：→ roy047: 正常 tank電極設計問題 08/22 08:00
3F：→ aj1139: 你用什麼壓膠？ 08/22 11:51
4F：→ blence: precast gel還浪費lane很不值得 08/22 12:23
5F：推 joseph103331: 可以試試全程放冰箱+80V左右去跑 08/22 12:59
6F：→ joseph103331: 自製的高趴數膠這樣跑都很直很漂亮 08/22 12:59
7F：→ Ianthegood: 老實講只是要收data的我才不管勒 要發paper的就浪費幾 08/22 15:40
8F：→ Ianthegood: 個lane也無妨XD 08/22 15:40
9F：推 aj1139: 啊我笨了，沒注意到是precast gel。跑的時候每個lane都有 08/22 16:50
10F：→ aj1139: 東西嗎？我建議是兩邊的lane不要下sample，但要加loading 08/22 16:50
11F：→ aj1139: dye讓電場穩定，個人最近才跑過過期三年的precast gel電 08/22 16:50
12F：→ aj1139: 壓200V都還OK。如果這樣還是有問題，可以找廠商確認，因 08/22 16:50
13F：→ aj1139: 為precast gel...品質不一定一樣，可能你那批貨有問題。 08/22 16:50
14F：→ aj1139: 。 08/22 16:50
15F：→ Ianthegood: 最常見就是銅線老化嘛 你看銅線最兩端是不是有金屬堆 08/22 17:30
16F：→ Ianthegood: 積 泡泡醋也許會好一點 08/22 17:30
17F：推 cyc5566: 改成40V 慢慢跑超級直 08/22 22:25
18F：→ chihsiao: 電泳槽那個是白金絲不是銅線 08/24 23:29
19F：推 KoiNoUta: 可是Biorad的precast gel不是建議要用200多V跑嗎？你這 09/08 20:03
20F：→ KoiNoUta: 樣電壓太低了吧 09/08 20:03