作者dasiy3112001 (~讓我考上吧~)
看板Biotech
標題[求救] PCR marker沒跑出來
時間Fri Aug 4 20:23:10 2017
如題，我是用波牌 １００bp DNA marker跟６X loading buffer，比例sample５：buffer
１，但照膠時marker沒出來就更別說有其他band了，UV照膠也都有設定，而且已經試兩次
都ㄧ樣，這是發生什麼事嘛？
再者pcr機器會有可能影響批不出東西的原因嗎？
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1F：→ blence: PCR機器當然不會影響UV照膠時marker沒出來 08/04 21:42
2F：→ dasiy3112001: 我是想問機器是否會影響無產物的情況呢？不好意思沒 08/04 21:46
3F：→ dasiy3112001: 講仔細。 08/04 21:46
4F：推 asdfgpooh: 配膠有加dye嗎？ 08/04 22:14
5F：推 e104582001: 一班來說沒有MARKER99%是膠沒做好，EtBr OR DNA染劑 08/04 22:16
6F：→ e104582001: 有加? 08/04 22:17
7F：→ xxtomnyxx: 先猜沒加染劑 08/05 00:47
8F：→ Ianthegood: 電極插反 旁邊load個1kb的看看 08/05 02:49
9F：→ Ianthegood: PCR批不出來的原因太多太多了 膠照不出來的倒是沒幾 08/05 02:51
10F：→ Ianthegood: 個 08/05 02:51
11F：推 susu8n0: 我猜膠是用水配的 08/05 17:26
12F：→ dasiy3112001: 但是都不是耶！電極也很肯定沒插反，也有加dye！膠 08/05 19:00
13F：→ dasiy3112001: 也是用TBE配的，我用這組marker跟loading dye已經跑 08/05 19:00
14F：→ dasiy3112001: 第二次都是ㄧ樣空無ㄧ物了…… 08/05 19:00
15F：→ dasiy3112001: 而且我是內染的 08/05 19:10
16F：推 Ianthegood: 確定電源供應器有啟動？如果是EtBr內染你照膠的時候 08/05 20:16
17F：→ Ianthegood: 膠下面1/3左右應該會有一條界線 有嗎？ 08/05 20:16
18F：推 hsnuyr: dye有跑出來嗎？有的話內染的EtBr或是DNA染劑微波完有等 08/06 00:52
19F：→ hsnuyr: 膠稍微冷才加嗎？我遇到通常都是太急著加但是溫度還太高 08/06 00:52
20F：→ hsnuyr: 所以degrade 08/06 00:52
21F：推 joseph103331: 內染不行就改一下外染 然後跑個plasmid當control 08/06 03:10
22F：推 susu8n0: 跟其他實驗室借已包含loading buffer的marker 08/06 14:47
23F：→ sunorange: 給個照片 ，比較好討論 08/06 20:25
24F：推 yfw: 建議補個圖片比較容易判斷 一般marker沒出來90%是膠沒做好 08/07 12:58
25F：→ dasiy3112001: 謝謝大家，我已知道原因了，但都不是大家猜想的哦！ 08/07 19:20
26F：→ leptoneta: 那請問是什麼因素呢? 08/07 20:43
27F：推 kuyar: UV波長不一樣嗎？ 08/07 23:40
28F：→ Misher: 我猜沒開UV光 XDDD 08/08 09:43
29F：→ dasiy3112001: 是我們家不用etbr染計，而是用無毒染計可兼loading 08/08 19:27
30F：→ dasiy3112001: dye用，但新買marker附的dye要外染，所以我很順手 08/08 19:27
31F：→ dasiy3112001: 的拿來用了，結果就GG 08/08 19:27
32F：→ dasiy3112001: 發現劑打錯，歹勢 08/08 19:28
33F：→ turtle24: 意思是原本的無毒染劑染不到新買的marker? 要專用的? 08/09 00:51
34F：→ Ianthegood: 他marker裡面已經有dye了就沒另外再加內染的loading b 08/09 00:59
35F：→ Ianthegood: uffer 08/09 00:59
36F：→ Ianthegood: PCR又剛好沒跑出東西 08/09 01:00