作者liberty5556 (赫拉克羅斯)
看板Biotech
標題[閒聊] 詢問大腸桿菌BL21(DE3)表達重組蛋白
時間Wed Apr 19 17:05:46 2017
http://i.imgur.com/4PlsdE0.jpg
問題是這樣的蛋白預計分子量為38kDa.(不含6x his )
但實際跑SDS-PAGE
目標片段跟marker比對。卻是介於40-55kDa..
請問該如何解呢
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 117.56.151.223
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1492592749.A.BB2.html
1F：推 satantaco: 合理 請想像1.膠體的3D立體結構 裡面有空隙 讓蛋白質 04/19 17:42
2F：→ satantaco: 在裡面跑 一樣分子大小蛋白質 折疊的比較密的 跑比較快 04/19 17:43
3F：→ satantaco: 比較鬆散的 跑比較慢2.分子量大小一樣 電性可能不同 04/19 17:43
4F：→ satantaco: 電泳跑快跑慢 很難說3.分子量標準品是某個蛋白用作比照 04/19 17:44
5F：→ satantaco: 所以某個片段大小 是相對位置 不是絕對位置 只能說應 04/19 17:45
6F：→ satantaco: 該在差不多位置附近 而不是絕對位置4.6XHIS也是有大小 04/19 17:46
7F：→ liberty5556: 了解！感謝你 04/19 18:16
8F：推 Ianthegood: 帶正電比較多的蛋白會跑得比較慢 壓個western或打個MS 04/19 19:20
9F：→ Ianthegood: 確認? 04/19 19:20
10F：推 asd03082002: 或者確認一下有沒有看對marker，遇過有人不管用什麼b 04/28 15:50
11F：→ asd03082002: uffer跑膠都看同一組，有時候就是band上面或下面的差 04/28 15:50
12F：→ asd03082002: 別 04/28 15:50