作者markonly (badguy)
看板Biotech
標題[求救] lentivirus concentration
時間Fri Nov 25 13:36:30 2016
各位好~小弟我因為lentivirus的titer不夠所以做了concentration，
但是re-titration後，titer好像沒有高多少，應該是我concentration失敗了，
我想請問是否有人做過virus的concentration?
可否給小弟一些建議?
以下是我concentration的步驟
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材料: Spin-x UF 20 Spin tube
1.用無菌水prerinsing 3次。
2.將病毒在室溫下解凍。
3.將病毒取到 tube 裡。
4.用 3000g，4度，離心，每3到5分鐘檢查一次。
5.當病毒液到我要的量的時候停止離心。
6.使用0.2 filter 過濾病毒。
7.存放在 1.5ml 冷凍管，並放在4度冰箱，兩天後開始進行titration。
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如果我步驟上有問題，還請各位不要客氣，用力鞭下去就對了!
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1F：推 shelix: 先濃縮再冷凍? 11/25 14:40
2F：→ soom: 4度C放兩天好像久了點 11/25 14:42
3F：推 poison7202: .2 um filter? 11/25 20:49
4F：推 MDCCLXXVI: 濃縮管 MWCO多少呢 11/26 21:56
5F：推 wanderchang: lenti比200nm小吧 11/28 12:25
6F：→ silverberry: 四度放太久了，病毒離開活體死得快~ 11/28 23:27
7F：→ silverberry: 哪個系列的載體包的? 比例如何? 11/28 23:28
8F：→ silverberry: .22 filter 是 PVDF or PES or? 11/28 23:29
9F：推 freedomk0115: 用簡單的glucose gradium搭配高速離心就可以解決了 11/29 16:25
10F：→ homeshawn: 個人好奇這樣加速減速對病毒的套膜會不會有損害@__@ 11/29 23:10
11F：推 silverberry: 之前用過超高速離心收，PBS均勻懸浮以後直接凍-80 12/01 00:06
12F：→ silverberry: 後來感染起來也沒什麼問題 12/01 00:07