作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
標題[求救] HCl泡過後DAPI會沒法染
時間Sun Oct 30 18:51:58 2016
我現在在做BrdU的蠟切，protocol中需要HCl去DNA denature，
根據ABCAM，我用2M HCl泡1小時，對照組用PBS。
曝光，沒有泡HCl的強度爆表(4095以上)，泡過得不到200。
這是泡過HCl
http://tinyurl.com/hd2usdk
http://tinyurl.com/jt62prf
沒泡HCl
http://tinyurl.com/zubm3of
http://tinyurl.com/zvl3lvu
看來HCl也會破壞DAPI的效果，請問各位染過BrdU蠟切片的，denature條件
都抓多少呢？
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"Don't hate the player. Hate the game."
當看到哪個名人賺了大錢，領到高額補助或利息，不要去指責他，
而是要指責那個制度、創造那個制度的人，以及默許那個制度的人。
不然你認為一個人不領18%或是一個人不炒房價，就會改變整體環境嗎？
還不如改變【修改制度的人】，才能從根源改變一切。
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1F：→ e104582001: 我怎麼記得DAPI是要卡在dsDNA中 10/30 23:24
2F：→ LIAR: 可是一般IF也適用HCl去處理，兩個可同時染 10/30 23:43
3F：→ e104582001: 我做過的IF從來沒有用過HCl... 10/31 00:52
4F：推 cyc5566: IF為什麼要用HCl? 10/31 12:00
5F：推 tynse71864: IF沒有吧！？ 10/31 21:08
6F：→ williamyang: 若是用EdU做click reaction就不需要HCl 11/01 04:04
7F：→ soom: 試試加0.1 M sodium borate pH 8.5, 室溫30分 去中和HCl 11/02 04:56
8F：→ soom: 另外，BrdU染色需要denature DNA所以需要HCl 11/02 04:58
9F：→ LIAR: 不能只有PBS去洗HCl嗎？ABcam也說sodium borate是option， 11/06 19:58
10F：→ LIAR: 我以為不重要。 11/06 19:58