作者ivan1209 (根本科科)
看板Biotech
標題[求救] HPLC tailing的問題
時間Thu Oct 6 04:55:59 2016
大家好，目前小弟在peptides合成的公司上班
今天遇到UPLC在主峰後面有類似tailing(or back shoulder)的問題，當然也有可能是back impurities
我之前大學專題跟研究所都是以研究有機合成為主
HPLC對我來說是完全新的東西目前慢慢在學
先假設這個情況是tailing來說
我的想法是利用ammonium acetate去過一下柱子之後在用95%水洗一下柱子之後再去跑samples
會這樣想是因為我猜NH4+也許可以binding在Si-O-上可以減少tailing的問題
不曉得這樣的觀念是不是有錯誤??
主管他們是決定用pH小於12濃度的的NaOH是洗柱子
結果確實是解決tailing的問題
想請教一下用鹼去洗柱子這樣是甚麼想法為什麼可以解決tailing的問題?
(我們公司很常利用1%TFA and 1g/L NaOH去洗prep HPLC)
非常感謝指教
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※ 編輯: ivan1209 (174.63.200.228), 10/06/2016 05:01:00
1F：推 Ianthegood: 主要不是bind到column而是留在column上的渣渣 OH-洗渣 10/07 16:00
那請問為什麼那些髒東西會造成拖尾呢? 如果很多東西應該卡住應該會阻塞變成fronting?
※ 編輯: ivan1209 (174.63.200.228), 10/07/2016 20:04:29
2F：推 Ianthegood: 不是阻塞而是你的東西會被retain在渣渣上吧 10/08 19:19
3F：→ ivan1209: 了解! 謝謝你 10/08 20:53