作者darrenyo (球)
看板Biotech
標題[求救] Western抗體reuse保存
時間Wed Aug 31 18:00:46 2016
如標題，想請問大家到底抗體reuse的保存方式怎麼樣最好呢？
上網查資料發現大家都是建議加sodium azide保存在四度
不過都是寫可以reuse三到五次
我們實驗室則是把抗體放-20 reuse，當然Freeze thaw cycle應該很傷
可是也常常可以reuse超過五次(internal control 甚至用了20次左右)
想請問實際使用上加Sodium azide保存四度到底可以reuse多少次或是放多久?
究竟怎麼樣保存最好呢? 感謝大家!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.113.136.218
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1472637649.A.257.html
1F：→ Ice9: 看抗體效價和milk/BSA新鮮度。3-5次是一般（-20度）。 08/31 19:40
2F：→ blence: 沒用過sodium azide,至於-20,可reuse效果跟你一樣 08/31 19:53
3F：→ heydream: 想問問抗體是指milk泡製完，冰在-20，也只reuse4-5次嗎 08/31 22:12
4F：→ heydream: ？ 08/31 22:12
5F：推 tz2733: 我是配在BSA裡的加sodium azide後 冰4度 沒長沉澱物就一 08/31 22:23
6F：→ tz2733: 直用...或Hy出來太弱就加一點新抗體跟BSA buffer(有冰半年 08/31 22:23
7F：→ tz2733: 一年還在用的...哈哈) 配在牛奶裡的則可能1-2個月就分層 08/31 22:23
8F：→ tz2733: 變色長東西 就丟了 08/31 22:23
9F：推 ktirene: 同樓上用法，冰一年也沒事～ 09/01 00:56
10F：→ darrenyo: 所以中間一直有reuse用一年沒問題這樣？ 09/01 01:06
11F：推 chousai: 想請問加sodium azide的目的是什麼？一定需要加嗎？據 09/01 02:23
12F：→ chousai: 我所知我們實驗室配一抗不會加耶！但都會reuse直到照不 09/01 02:23
13F：→ chousai: 太出來 09/01 02:23
14F：→ ghjkl5566: NaN3很強的抗菌劑 但也很毒 若加了記得一定要戴手套 09/01 02:54
15F：推 boblu: case by case 啦。 BSA + NaN3 強的抗體可以一管用到畢業 09/01 04:30
16F：推 formoxa: 我認為主要是看抗體，有reuse10次就掛掉的也有1年OK的 09/01 16:07
17F：→ darrenyo: 想請問樓上是冰-20 還是4度呢? 09/01 18:08
18F：推 formoxa: 我都冰-20，4度壞很快 09/06 15:10
19F：→ formoxa: 還有配抗體就不要用牛奶了，用BSA比較穩定延後腐壞時間 09/06 15:16
20F：推 tynse71864: F大是用 5%Bsa嗎 09/06 16:34
21F：→ blence: 凍-20都可以用半年了,改用BSA的誘因是什麼？ 09/06 16:58
22F：→ blence: 而且配抗體選用BSA或牛奶,不是以哪一種適合reuse在考量 09/06 16:58
23F：→ blence: 主要的考量因素還是WB結果,呈色不好看,能保存久放也沒用 09/06 17:00
24F：→ formoxa: 當然是以結果考量，如果經費許可原PO又想reuse為什麼 09/07 14:04
25F：→ formoxa: 不優先選等級比較高的？ 09/07 14:05
26F：推 formoxa: 是，我是用5% BSA 09/07 14:14
27F：→ formoxa: 但是我沒加NaN3，這你可以自行決定 09/07 14:17
28F：→ blence: 會用牛奶就是多數抗體在5％BSA的效果都不好,這就是限制了 09/07 16:20
29F：→ blence: 跟等級無關,你應該先釐清有誰願意改變data結果,只為reuse 09/07 16:29
30F：→ blence: 而且如果BSA稀釋的data好看,早就凍在BSA reuse,沒換的必要 09/07 16:32
31F：→ formoxa: 你講反了;另外原PO也只是在問reuse 09/07 21:02
32F：→ Eyer: 常保低溫，在4度hy 09/18 19:08
33F：→ Eyer: 不過價力低的抗體可能難在4度hy 09/18 19:10