作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
標題[求救] 請問如何動態追蹤細胞是否複製？
時間Sat Aug 27 13:59:55 2016
我取了腦組織做培養，primary不會太純，只少astrocyte一定有，
平常都有ARA-C抑制生長，如果沒加的話，過一星期就會看到滿滿的非神經細胞。
現在我觀察到細胞成團，而且會越來越大，所以有兩種可能
1.replication，可能Cytarabine沒能完全抑制
2.migration，就只是旁間零星細胞的聚集
如果用brdU固定染色就只有一個時間點，我想用timelapse追蹤確認
請問哪些辦法，可以持續追蹤一個增大的細胞團是因為複製或別的細胞移動聚集？
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"Don't hate the player. Hate the game."
當看到哪個名人賺了大錢，領到高額補助或利息，不要去指責他，
而是要指責那個制度、創造那個制度的人，以及默許那個制度的人。
不然你認為一個人不領18%或是一個人不炒房價，就會改變整體環境嗎？
還不如改變【修改制度的人】，才能從根源改變一切。
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1F：推 jabari: 去買一台Lonza的Cytosmart 就可以啦... $$$$ 08/27 14:33
2F：→ LIAR: 唉！有錢大家都可以發seience了，說點沒錢的方式吧XD 08/27 14:48
3F：推 captdavince: 你可以用染的，cell tracker, 染了再養，有很多種 08/27 14:51
4F：→ captdavince: qdot的比較貴，但是如果是replicate的話螢光強度減半 08/27 14:52
5F：→ captdavince: 的趨勢好像比染料的好. 08/27 14:52
6F：推 payton103075: 若migration的細胞有特定maker 可以染活體螢光看不 08/27 15:31
7F：→ payton103075: 時間 看是否有移動以及細胞團是否有螢光出現? 08/27 15:31
8F：推 goodday06: timelapse microscopy 直接觀察? 08/27 16:57
9F：→ LIAR: 我們有timelapse，但懸浮球的xyz很難定位，又會旋轉... 08/27 21:30
10F：→ Ianthegood: 對啊pulse chase的染色 hoechst染核就可以了吧 08/27 22:39
11F：→ LIAR: 不過隨時間不分裂hoechst也會弱掉吧？我應該如何比？ 08/28 00:21
12F：→ LIAR: 而且顯微鏡螢光不是最好別定量？ 08/28 00:21
13F：推 Ianthegood: 上flow? 再用fixed又染過的細胞當control 08/28 03:12
14F：→ goodday06: sorter 分離不同群細胞--> 螢光dye標定特定細胞 08/28 18:28
15F：→ goodday06: -->再混合回去養-->追蹤螢光分布 08/28 18:28
16F：推 h3250sam: 染CFSE這種CellTrace dye，分成實驗組和抑制分裂的 08/29 00:13
17F：→ h3250sam: control組，收細胞上flow看螢光強度，沒分裂的話螢光強 08/29 00:14
18F：→ h3250sam: 度應該會和control一樣，有分裂就會呈現螢光衰減分佈 08/29 00:15
19F：推 h3250sam: 還可以配合特定marker進行複數染色，區分出不同細胞群 08/29 00:19