作者reiosea (reiosea)
看板Biotech
標題[求救] 羥脯胺酸濃度測定
時間Wed Aug 17 04:56:22 2016
大家好
小弟最近要測定膠原蛋白的濃度，膠原來源為sigma購買之膠原蛋白溶液。
所使用的方式為sigma所購買的hydroxyproline assay。
其中一個步驟是先將膠原蛋白加上12N的HCl於120oC下酸化三小時，
再來置於60oC讓HCl揮發。
But，我使用kit規定的PTFE-lined cap以及瓶子，於120oC下酸化三小時還是會揮發。
想請教有做過的先進這樣的情況是正常的嗎？由於他的第二步驟是在60oC讓HCl揮發，
所以我硬做了一次，不管他在120oC揮發了多少，經過60oC處理後回溶，發現幾乎測不到
hydroxyproline的存在。溫度控制皆在烘箱下進行
懇請有做過的大大給予指點ＱＱ
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1F：推 e53953811: 魯妹最近也失敗，放在烘箱但是三小時之後蓋子裡面整 08/18 15:33
2F：→ e53953811: 個爛掉，已詢問到做過此實驗的善心人士，問完在告訴 08/18 15:33
3F：→ e53953811: 你QQ 08/18 15:33
4F：→ reiosea: 感謝正妹！！我最近有成功，蓋子不要蓋太緊。 08/19 07:58
5F：→ reiosea: 感覺是因為旋太緊，瓶子遇熱膨脹才把PTFE擠破。 08/19 07:59
6F：→ reiosea: 若您有問到什麼秘訣再請您跟我說ＱＱ 08/19 08:00
7F：推 e53953811: 是因為懸太緊嗎？可是他告訴我要旋緊欸！所以你是沒 08/19 20:14
8F：→ e53953811: 旋緊成功了嗎？ 08/19 20:14
9F：→ reiosea: 我是旋轉至緊後再用力旋一下，之前都是死命旋緊。 08/20 03:34
10F：推 e53953811: WTF 我狂煮乾欸！蓋緊跟鬆結果都乾掉… 08/26 13:12
11F：→ reiosea: 我現在做都不會蒸發了耶，請問你是用PTFE-lined cap嗎？ 08/27 01:26