作者yaboo (我不是yahoo)
看板Biotech
標題[求救] transwell做invasion assay
時間Wed Aug 3 15:24:22 2016
各位高手好～
我最近在用millipore的8um孔徑transwell做invasion的實驗
上面coating 50ul的1:1稀釋matrigel
使用的是BxPC3和H441兩種細胞
分別在48和72小時收實驗
想請問各位大大
在清除matrigel的時候
可以直接用suction吸掉嗎？
因為很擔心穿過去的細胞又會被吸回去甚至被吸到不見
但是用棉花棒擦的話耗時而且很難擦乾淨 偶爾還有棉絮 甚至一個不小心就把膜給戳破
不知道有沒有兼顧效率和品質的方法><
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1F：→ raiyu: 我是比較常做migration 印象中1.是coating完37度等30分鐘後 08/03 18:48
2F：→ raiyu: 就吸掉 再加細胞 2.棉花棒會先稍微拉鬆沾濕 然後我會準備2 08/03 18:51
3F：→ raiyu: 種size的棉花棒 粗的(一般掏耳朵的)清大範圍 細的清細部 08/03 18:52
4F：→ raiyu: 然後就是小心囉 08/03 18:53
5F：→ raiyu: invasion比較不常做 所以1不是很確定 08/03 18:55
嗯嗯謝謝你～ 但有點好奇為什麼你步驟1 coating完又要吸掉呢？是只要保留非常少的
matrigel嗎？我migration都是用wound healing，沒看過你的作法有點好奇～
※ 編輯: yaboo (140.112.212.175), 08/05/2016 00:48:14
6F：→ raiyu: 只有膜上有就好，我是靠著transwell的邊邊吸 而且我的稀釋 08/05 10:05
7F：→ raiyu: 比例是1:10 所以它還是很水樣 08/05 10:06
8F：→ raiyu: migration就只差沒coation而已 跟wound healing的migration 08/05 10:07
9F：→ raiyu: 可以看不同東西 08/05 10:07