作者cyc5566 (西哇西)
看板Biotech
標題[求救] 老化marker beta galactosidase染色
時間Fri Jul 1 16:17:08 2016
各位版友好,
我的研究題目與老化相關,所以需要建立體外cell line aging model.
最近卡在 beta-gal 的染色實驗需要各位給我一點意見.
我使用Hydroxyurea還有Etoposide誘導cell line老化,
這兩種藥物都有文獻支持可以在cell line上成功誘導老化並有beta-gal染色positive.
這是我希望得到的結果(from google)
http://imgur.com/6eWRR0e
可是我染出來的結果卻不如預期,Control組與藥物組的結果如下圖:
Control
http://imgur.com/HrYXl3i
Hydroxyurea 600microM 14天
http://imgur.com/fKmjGPt
Etoposide 10microgram/ml 14天
http://imgur.com/QsNOo7F
最近一直盯這看,我都覺得好像有一點點綠色了(自我催眠)....
另外,染色的技術已經用老化的primary cell做過測試,kit也沒問題,都是positive.
可以麻煩各位給我一點意見嗎?我已經不知道怎麼調整比較好了,謝謝!
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1F：推 mandible: 其實慢明顯了，只是你細胞養的太滿了吧 07/02 09:10
2F：推 darrenyo: 怎麼倍率不同@@？ 07/02 15:26
3F：→ cyc5566: 好的我會減少細胞數，另外倍率是一樣的哦，老化的細胞核 07/02 23:01
4F：→ cyc5566: 會變大，整個細胞膜攤平 07/02 23:01
5F：→ aaa111bb2: 1. 細胞數減少。2. PBS Wash x2。 3. 顯微鏡是黃光 減 07/07 02:46
6F：→ aaa111bb2: 光片拿掉。 可以改善很多 07/07 02:46
7F：→ tchan: 反而覺得是control染太深，也許減少染色時間看看... 07/09 21:46
8F：→ tchan: 但是你實驗組的細胞明顯比較不健康，可能需要確定是否有死 07/09 21:47
9F：→ tchan: 你實驗是誘發細胞老化而非細胞死亡，那些細胞感覺快死了 07/09 21:48
10F：推 cjsntu: 好像本來就不太好染 03/27 23:27
11F：→ cjsntu: 另外是跟盤子的材質有關，印象中要避開PE還是PP的樣子 03/27 23:27