作者elsavicky (Vicky)
看板Biotech
標題[求救] genotyping最近一直p不出來
時間Wed May 25 18:13:34 2016
最近genotyping某個gene一直p不出來，但一樣的reagent去p另一個gene有出來。
已經trouble shooting過，包括換新的pcr grade water, reagent, primer等，依然有一樣的情形發生，所以想請教板友，謝謝。
目前的結果
http://i.imgur.com/LccVwxM.jpg
以前正常的結果
http://i.imgur.com/BVfkrrR.jpg
以前和現在的pcr條件都一樣，沒有改變
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1F：→ sunorange: 把你的DNA稀釋就會出來了 05/25 22:09
2F：→ e104582001: DNA下太多了 05/25 22:40
3F：→ elsavicky: 有稀釋過DNA,也有放positive control(以前Ｐ得出來） 05/25 23:12
4F：→ elsavicky: 在smear的部位隱約有清楚的major band... 05/25 23:14
5F：→ elsavicky: 忘了說...連negative control都是一樣smear狀 05/25 23:39
6F：推 patricksky: primer汙染? 05/26 10:09
7F：→ patricksky: primer換新的是只重訂一隻 還是只是重新稀釋? 05/26 10:09
8F：→ elsavicky: 全部重新訂過，用新買的pcs-grade water稀釋（在hood） 05/26 12:12
9F：→ elsavicky: pcr grade water 05/26 12:13
10F：推 patricksky: 如果全部材料都換過 就有可能是環境或是人為操作問題 05/26 13:29
11F：→ patricksky: 比較常見就是pipetmen的頭汙染 05/26 13:30
12F：→ patricksky: 能拆就拆 然後頭部分泡泡酒精 接著丟去滅菌 05/26 13:32
13F：→ patricksky: 如果不能拆或怕的話 做簡單滅菌也可以 05/26 13:32
14F：→ patricksky: 另外要注意的是之後pipet清理後記得做校正 05/26 13:33
15F：→ elsavicky: 謝謝你，我們也懷疑是pipette污染，今天去hood操作，已 05/26 14:38
16F：→ elsavicky: 經p出來了！ 05/26 14:38