作者satan317 (貞夫)
看板Biotech
標題[求救] 關於細胞冷凍
時間Mon Apr 18 11:45:30 2016
想請問如果解凍養一代就再冷凍
會不會影響細胞內部的一些機制
導致降低重複實驗的再現性
還是只是會影響存活率?
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1F：→ untilnow: 解凍一代再冷凍的目的是? 04/18 12:10
2F：推 greenmoon00: 建議不要，細胞解凍後其實蠻脆弱的，至少養個三代左 04/18 12:49
3F：→ greenmoon00: 右，確定細胞健康後再凍 04/18 12:49
4F：→ satan317: 因為老闆要求實驗用的細胞都是在同一代 我那時候凍大概 04/18 13:54
5F：→ satan317: 是算在我要做實驗那代的前五代 我怕凍的那些細胞不太夠 04/18 13:55
6F：→ satan317: 後續的實驗 想說解凍一到二代再冷凍 之後解凍剛好養三代 04/18 13:56
7F：→ satan317: 再做實驗 所以想問說如果這樣凍的話是影響存活率還是內 04/18 13:57
8F：→ satan317: 部機轉 如果只是影響存活率的話 對我沒有差別這樣 04/18 13:58
9F：→ blence: 細胞的機制這麼多,所謂的影響,也不一定會跟你的興趣相關 04/18 14:03
10F：→ blence: 而且細胞是活是的存活狀況,不也是細胞內的機制在調控嗎？ 04/18 14:04
11F：→ blence: 死 04/18 14:04
12F：→ blence: 如果你的細胞不是特別怪,你可以考慮以有限的凍管先做幾次 04/18 14:09
13F：→ blence: 同時用後面一兩代也留著試試,確認代數是否很關鍵 04/18 14:10
14F：→ blence: 以不同代的凍管養到同一代的細胞實驗,跟同一批凍管前後代 04/18 14:13
15F：→ blence: 的結果還要差,如果老闆很在意data的,就不會拘泥要同一代了 04/18 14:16
16F：→ satan317: 感謝你的建議 04/18 14:29
17F：→ Ice9: 如果對照因素和你老闆做的那一代没什麼差異，基本上可以不用 04/18 17:20
18F：→ Ice9: 擔心代數問題。如果代數結果有差異，那表示你們要控制代數問 04/18 17:22
19F：→ Ice9: 題，而且你們的實驗可能要重新設計。 04/18 17:24
20F：推 joseph103331: 確認代數是否為關鍵+1 不然你就要考慮做cell bank 04/19 02:18
21F：→ joseph103331: 設定留存的細胞代數以及工作用的細胞代數, 才知道 04/19 02:20
22F：→ joseph103331: 用量, 也才好抓條件, 不過這個在細胞株應該沒甚麼 04/19 02:20
23F：→ joseph103331: 必要才是....差個一兩代不應該有差 04/19 02:21
24F：→ ararthur: 差一兩代這個因子 跟細胞當下狀態對實驗結果的影響比起 04/29 13:50
25F：→ ararthur: 來 通常是小巫見大巫 不過或許你老闆曾經有這方面的慘痛 04/29 13:50
26F：→ ararthur: 經驗也說不定 如果細胞是具與differentiation potential 04/29 13:51
27F：→ ararthur: 也可能passage之間差異頗大 依舊要小心 04/29 13:51