作者s9923042 (MICKEY)
看板Biotech
標題[求救] 抽取E.Coli DNA
時間Tue Dec 15 21:59:14 2015
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想請問大家有關抽DNA的問題
由於實驗的關係所以要抽取大量DNA
因而起初要先培養1.5L的菌液
實驗方法
6瓶500mL錐形瓶加入250mL LB培養液與250ul抗生素
隨後放入100ul菌液(LacZ β-galactosidase)
問題來了，第一次抽取問其它實驗室出現兩種答案
1.培養16~17小時就可以開始抽了 或
2.測O.D.值(那間實驗室也說得不清楚!!!)完後就可以抽了
想請問大家O.D.大致上要多少會比較好?
麻煩大家有抽過的告知一下謝謝~~~(感恩)
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1F：→ a90648: 對2有疑惑為什麼不選1的方式? 12/15 23:02
2F：→ a90648: 再者不建議500ml養250ml，一般是養瓶子容量的1/5 12/15 23:03
3F：推 tynse71864: 1就可了 然後你瓶子/菌液體積真的要改 這個影響很大 12/16 00:23
4F：→ turtle24: 換氣率不夠，瓶子要換大 12/16 12:19
5F：→ Ice9: 你應該先研究一下protocol本身。另外，瓶子要換，你裝1/2瓶 12/16 18:45
6F：→ Ice9: 一定會濺漏出來。雖然知道你是要抽質體DAN，但你要是名稱寫 12/16 18:46
7F：→ Ice9: 清楚，比較不會擔誤大家思考。另外，一般選方法1就好，除非 12/16 18:47
8F：→ Ice9: 碰到特例。特殊菌種或質體內嵌的基因太怪，有時要微調。 12/16 18:48