作者rusly (因風飛過薔薇)
看板Biotech
標題[求救] trypsin 回溶流程
時間Thu Sep 24 10:40:18 2015
各位好
今天突然發現實驗室裡面大家 回溶trypsin的方法很不一致XD
我們實驗室是在做蛋白質鑑定的 因此需要用trypsin把蛋白質切成胜肽
1)有的方法是 把trypsin從-20度取出，加buffer後放在冰裡靜置20~40分鐘再使用
2)有的方法是 把trypsin從-20度取出，加buffer後直接在室溫下放20分鐘後開始使用
請問~~ 上述這兩種方式有差很多嗎@@
後者會讓trypsin失去活性嗎? 還是其實兩者差異不大呢
請前輩們指教~~ 謝謝!!
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1F：推 caesar0926: 多少會。個人覺得重複解凍比較傷，另外trypsin作用最 09/24 11:35
2F：→ caesar0926: 好是在37度吧，室溫20分應該是還好。是說是解凍還是回 09/24 11:36
3F：→ caesar0926: 溶??.. 09/24 11:36
4F：→ caesar0926: 結論是個人認為差異不大，但是硬要比2應該會傷一點。 09/24 11:38
5F：→ caesar0926: 個人意見有錯請指正!謝謝 09/24 11:38
謝謝ceasar大的回覆!!! 上述的狀況是要把粉狀的trypsin加buffer成溶液的狀況
※ 編輯: rusly (140.122.136.115), 09/24/2015 12:09:29
6F：推 icheee: 粉狀的 trypsin 我都存在4'C 耶… 09/27 10:31
7F：推 joann88431: 其實....我都用手握住加溫....(不要被學長姐發現的話X 10/04 10:43
8F：→ joann88431: D) 10/04 10:43
9F：→ chvkimo: 本lab 粉也是存放在4度C,還是你家買的是-20保存? 10/17 10:10
10F：→ chvkimo: 不的過我指的是cell culture用的 10/17 10:11
11F：→ rusly: 我們是保存在-20度喔！ 10/17 20:16