作者kagami91582 (GaryJ)
看板Biotech
標題[求救] BrdU染色體相關問題
時間Thu Sep 17 17:07:09 2015
[幫朋友代PO]
想問一下有沒有人有做過老鼠的腦的海馬迴切片染BrdU和DCX的實驗?
我一開始染的時候BrdU和DCX都成功
但是BrdU一抗之前用完買了新的一管後BrdU就染不出來了
之後又跟廠商要了2管新的BrdU一抗和跟別的實驗室借的一管也是都染不出來
也作了以下驗證
1.本來以為是我自己有什麼疏失 但是找別人染也是一樣結果
加上以前都有染成功 所以排除了中間操作的步驟有疏失
2.拿之前有染成功過的同一批片用新的BrdU染也沒有東西
所以也排除是給老鼠打的BrdU有問題
3.染的片中DCX都沒有問題 只有BrdU是暗的
雖然目前得出結論是廠商的一抗出問題
但是已經換了2管和別人家的1管都沒有出來 感覺就很奇怪
不知道大家有沒有頭緒還有什麼東西我沒注意到或別的測試方法
還是說真的是廠商雷? 我染了10幾次了快崩潰了QAQ
PS:新買的一抗的編號有跟之前用完的那管一樣的一管
也有換另一個編號的 然後是跟X晉買的
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1F：→ kagami91582: 補個照片 09/17 17:34
4F：推 milkberry: 可以參考這篇nature protocol 09/17 23:06
朋友表示會研究看看 再次感謝//
6F：→ milkberry: t.2006.224.html 09/17 23:06
7F：→ jack33: 你有記得先打洞(permeable)嗎? 09/18 17:30
朋友表示有先打洞了
※ 編輯: kagami91582 (114.38.126.46), 09/19/2015 00:14:53
※ 編輯: kagami91582 (114.38.126.46), 09/19/2015 00:15:32
8F：→ williamyang: 有denature DNA嗎?不然BrdU抗體會認不到 09/19 00:56
9F：推 pandagod: 用相同方式染，以前可以出來，新的染不出來，不同的只 10/06 12:33
10F：→ pandagod: 有抗體，那就是抗體出問題了阿，跟廠商反應比較快... 10/06 12:33
11F：→ pandagod: 另外抗體在運送過程的condition可能不一樣，之前也發生 10/06 12:35
12F：→ pandagod: 過這樣的情形也是請業務處理 10/06 12:35