作者a089336395 (小欣欣)
看板Biotech
標題[求救] western 製膠問題
時間Tue Aug 4 11:03:59 2015
各位大大...
最近換到了新的實驗室，膠就開始出現鬼打牆的漏sample的問題...
主要問題就是在loading sample的時候，sample會從上膠的well中漏到下膠的上緣，大概
兩三次都出現相同的情況...所以開始抓錯:
1.已從副廠玻璃換成原廠
2.重新配製tris 8.8,6.8
3.確定甲醇壓膠時吸乾並揮發完全
4.提高Aps的使用量，並重新於-20解凍新的...
5.非常小心的拔齒疏
但還是會出現這個狀況...
也懷疑是齒疏的問題，但漏的well是隨機的，所以暫時排除..
有沒有人也遇到相同的問題呢??
求救...已崩潰!!
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1F：推 david6602ok: 這樣不就省了上膠跑的時間，會擴散嗎？ 08/04 11:22
2F：→ blence: 齒梳比厚玻璃還厚? 08/04 11:30
3F：→ a90648: 鋁板有殘膠? 08/04 11:42
4F：推 ararthur: Comb太厚吧 gel casting時要很用力插進去嗎 08/04 11:56
5F：→ a089336395: 是用bio rad原廠1mm的玻璃跟comb, 08/04 12:49
6F：→ a089336395: 就是sample會擴散，導致量不準 08/04 12:49
7F：→ blence: 1mm的comb跟玻璃還蠻特別的,應該不是用0.75或1.5mm？ 08/04 14:13
8F：推 captdavince: acrylamide? 08/04 15:43
9F：→ huosheng: 先前遇過漏的問題, 有可能是在膠與玻璃產生間隙導致,但 08/04 17:42
10F：→ huosheng: 不影響跑膠結果 08/04 17:43
11F：推 gps0110: 我用原廠comb有時也有這種問題 08/04 21:33
12F：推 ron55663: 齒梳大小有差 太厚會漏膠 以前也遇過 08/05 13:03
13F：→ a089336395: 所以覺的是comb,而不是做膠本身試劑的問題嗎？ 08/05 14:01
14F：推 gps0110: 我們實驗室同樣biorad的comb 應該是相同厚度的 厚度卻有 08/05 22:46
15F：→ gps0110: 點詫異 插comb的時候蠻明顯能感受出來 08/05 22:46
16F：推 LIAR: 我用副廠的器具都不會有這種現象。玻璃片兩邊有清乾淨？ 08/09 11:46