作者bluebluewind (藍風)
看板Biotech
標題[求救] HPLC初學 peptide流動相的選擇
時間Fri Jul 31 14:47:13 2015
大家好
我現在是HPLC的初學者
最近遇到要用HPLC來分析peptide
之前問過生技公司的業務
她建議我用甚麼溶peptide就用甚麼當流動相
所以目前我選用的流動相是PBS
想請教大家在分析peptide時都是選甚麼當流動相呢?
謝謝
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1F：→ yuasa: 我不做peptide也不是HPLC高手，但我想應該不會有人選用PBS 08/01 00:23
2F：→ yuasa: 要選也是用水 甲醇或acetonitrile之類的溶劑下去混梯度吧。 08/01 00:25
3F：推 huangsw: 你要不要...先google一下HPLC的相關資訊阿 QQ 08/01 00:51
4F：推 leptoneta: 你要不要先看看是用什麼管柱??? 08/01 01:07
5F：→ yuyumom: 蠻酷的 實驗室有學長姊可以教你嗎 或考慮修一下層析學 08/01 12:11
6F：→ ryokoon: 用PBS你確定????管柱是哪支? 08/01 13:24
7F：推 ryokoon: 去查一下相關paper必較好，有時業務講的信一半就好XD 08/01 13:30
8F：推 rusly: 去查paper 搜尋LC-MS的看看 通常都是水相 08/03 18:08
9F：推 HOHO0220: 問hplc儀器的技術專員 08/04 15:11
10F：→ as77as77: 95% ACN 5% H2O 還有 100% H2O 跑gradient 08/05 23:45
11F：→ as77as77: Column 應該都是用reverse phase 的column 08/05 23:46
12F：推 Peetu: peptide如果分子大，一般不會用RP吧~ 10/27 23:06
13F：→ Peetu: 蛋白質一般都會使用size exclusion column 10/27 23:07
14F：→ Peetu: MP就用水或是鹽類如phosphate之類的，可以算一下PI值 10/27 23:09
15F：→ Peetu: 用PI值去找適當的MP~ 另外如果用ion exchange就要調一下pH 10/27 23:10
16F：→ Peetu: PBS當mobile phase是可以的喔~ 做蛋白質很常用到阿! 10/27 23:11
17F：→ Peetu: 會用ACN的一般都是RP column，分析peptide建議用分子篩 10/27 23:13
18F：推 HPLC: PBS很常用...移動項要看column來決定 不是HPLC就是用ACN Me 11/21 00:46
19F：→ HPLC: OH 跟水 11/21 00:46