作者clownegg (丑蛋)
看板Biotech
標題[求救] MTT顏色超淡
時間Fri Jun 26 13:35:12 2015
小弟目前單純養細胞 沒有給藥
條件是96well每個well一萬顆
細胞是H1299
Medium是 RPMI1640 + FBS + PSN + pyruvate
流程是
Seed完 等24h貼壁
換成有MTT的Medium(0.5mg/mL) 等4小時
換DMSO溶解
結果顏色超淡的
自己有試過改變細胞數量到兩萬 還是很淡
MTT開新的來用 還是很淡
目前懷疑是算細胞的機器不準
或是在96well 細胞長不好
畢竟seed完看起來完全沒有一萬顆的感覺
總之 很多疑點自己也在排除中 如果有大大也遇過MTT顏色很淡的情況
可以分享一下解決的方法嗎 謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.120.9.48
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1435296915.A.0BC.html
1F：→ Ianthegood: 你有讀過吸光值了嗎 06/26 14:09
之前有 但是非常低幾乎都在0.3以下
所以後來只看顏色就覺得不行 最近的都沒有測
※ 編輯: clownegg (140.120.9.48), 06/26/2015 14:19:36
2F：→ Ianthegood: 就算低 有correlation嗎 06/26 14:24
correlation是? 我是用elisa reader 好像沒有校正這個步驟
※ 編輯: clownegg (140.120.9.48), 06/26/2015 14:28:26
3F：→ Ianthegood: 你的吸光值跟細胞數量有沒有正相關 06/26 17:01
4F：→ zoe77101y: 拍一下顏色看看 06/29 01:26
5F：→ chvkimo: MTT 5mg/mL stock 壞了嗎? 還是已經是新配的? 07/20 21:51
6F：→ chvkimo: 我近期也有在用 H1299做MTT. 但我是用2000 cell/well 07/20 21:52