作者eddieody (歐弟)
看板Biotech
標題[求救] EGFP only 代表的意義？
時間Thu May 14 14:26:36 2015
小弟剛接觸 transfection ,
有練習用 confocal 去看 cells 的 protein 運送的情形
有個地方不太了解，EGFP 是個螢光 protein，常會看到某 gene/EGFP 的 plasmid DNA
來 transfection, 意思是要讓某 gene 的量增加，並且有 EGFP 可以追縱，
那麼，一般還會用一個只有 EGFP only 來當 control, 我不了解只單獨 transfection E
GFP 時，發螢光的就只是送進 cells 內的 EGFP protein, 這樣的意義是為什麼呢？這樣
從 EGFP only 的 cells 觀察到他綠色螢光不就只是單純的 EGFP 嗎？怎麼跟實驗組比較
？
能當實驗組的 control 的原因是什麼？
我查了一些簡單的文獻還是不太懂。。。
有人可以指點一下嗎？謝謝。
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.49.20
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※ 編輯: eddieody (140.109.49.20), 05/14/2015 14:32:22
1F：→ Bows: 因為你實驗組裡面也有送EGFP進去，你能保證你的結果不會是05/14 14:33
2F：→ Bows: EGFP造成的嗎?05/14 14:33
3F：→ Bows: 要讓細胞間的差異只有你的target protein 05/14 14:34
4F：→ Bows: 所以除了target以外，實驗組有的對照組都要有 05/14 14:34
5F：推 leptoneta: 證明你的結果是送入基因造成 而不是送入EGFP造成05/14 15:54
6F：→ leptoneta: 比如說你把藥溶於DMSO 那你control組就要加DMSO 05/14 15:55
7F：→ eddieody: 所以說假設我treat樣品後 05/14 17:03
8F：→ eddieody: 在confocal 發現某gene /EGPF從他會從細胞質跑到細胞膜 05/14 17:03
9F：→ eddieody: ，那麼 EGFP only 組沒螢光大部分都還在細胞質內，所以05/14 17:03
10F：→ eddieody: 代表是那個 gene 是確時在treat 後有這樣的能力對吧？05/14 17:04
11F：→ eddieody: ？05/14 17:04
※ 編輯: eddieody (140.109.49.20), 05/14/2015 18:50:26
12F：推 e104582001: yes 05/14 21:52
13F：→ eddieody: 感謝各位的解答 05/15 09:19
14F：→ Ice9: 另外還有當 transfection efficiency 的指標——如果你的實 05/15 10:01
15F：→ Ice9: 驗組 plasmid 上没有 EGFP gene 的話。 05/15 10:02