作者cheug0653 (Tiny Orbit)
看板Biotech
標題[求救] MTT數值怪異
時間Sun May 10 23:05:12 2015
http://www.trevigen.com/docs/protocol_4890-XX-K.pdf
我是按照這個Protocol做實驗的
順序一模一樣 都沒有少做(但沒寫在上面的我也沒多做)
(如果懷疑我可能有認知錯的地方也可以提出 謝謝)
唯一不同的是給我的detergent reagent不是Cat# 4890-25-02
是4892-010-02 我想問是不是廠商給我的藥有錯 如不是請繼續往下看
兩次實驗的結果 blank的吸光值都在0.35上下
control大都0.70上下
問題是藥物的濃度愈高 竟然吸光值是愈高的
第二次我多做了細胞數的不同
3x10^4/well的(100% 70% 50% 30% 10%)細胞數的control吸光值
並沒有發現顯著差異
趨勢也和第一次實驗一樣 藥濃度愈高 吸光值愈高(0.7一路增加到1.3)
目前我無法處理數據 請各位資深的朋友多幫忙指正囉
感謝
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1F：→ zoe77101y: 時間呢？放多久！！ 05/11 08:23
2F：→ cheug0653: 貼24小 作用24小 mtt2.5小 detergent 2.5小 目前叫廠商 05/11 18:10
3F：→ cheug0653: 換藥 因為應該是送錯藥了 我當初問還說沒問題= = 05/11 18:11
4F：→ blence: 看用詞有點不習慣&如果瞭解MTT,換之前加DMSO就先看結果了 05/11 19:13
5F：推 DrPiGu: 你們的藥是不是在650也有吸光值? 先掃一次看看 05/12 02:20
6F：→ cheug0653: 原本Protocol中的那支藥是SDS 不是DMSO喔 05/12 12:48
7F：→ cheug0653: 650是吧 我會試看看 謝謝 05/12 12:48
8F：→ cheug0653: 我是新手 只照著Protocol做 因為沒有人在旁指導QQ 05/12 12:49
9F：推 qiet: 肉眼看結晶就知道結果了, 跟用什麼solvent應該比較無關 05/12 23:24
10F：→ qiet: 波長只要是在說明書範圍內應該都沒問題 05/12 23:25
11F：推 qiet: 不同細胞數那邊的結果是得不到預期差異的意思? 05/12 23:27
12F：推 qiet: 也是有可能使用的MTT不適合你用的細胞株... 05/12 23:29
13F：→ qiet: 或藥物可能會影響到去氫酶酵素的活性 ~"~ 05/12 23:30
14F：→ qiet: 但blank(medium only?)那麼高藥可能怪怪的, 換了做一次就知 05/12 23:31