小弟目前在做sirt1酵素的純化
此酵素是從addgene公司買來的
之後養在BL21 E coli細菌後
經過一般步驟
最後用his tag purification resin進行純化
最後做SDS跑膠時發現我的major band在110kda以上
不過addgene買來的sirt1上面寫大概在81kda
不知道是哪裡出問題
請高手幫忙><
http://i.imgur.com/8WZIInx.jpg
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 101.14.19.58
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1F：→ Ianthegood: 有addgene的資料嗎 03/25 10:57
※ 編輯: dennissnake (101.14.19.58), 03/25/2015 11:03:11
2F：→ blence: sirt1各家Ab染出來的都是110kda附近,81kda是seq predict 03/25 11:07
4F：→ dennissnake: 這是addgene的sirt1 03/25 14:11
6F：→ dennissnake: 分子量差這麼多是因為他除了his tag外還有其他tag嗎! 03/25 14:12
7F：→ dennissnake: ?? 03/25 14:12
8F：→ dennissnake: 差30kda感覺頗大QQ 03/25 14:12
10F：→ GG810424: mage/BML-SA427_WB.jpg 03/25 15:52
11F：→ blence: 都說FL就110了怎會去懷疑tag，這種情況常有，少見多怪 03/25 16:27
12F：→ dennissnake: FL是什麼意思阿? 03/25 20:35
13F：→ e104582001: full length 03/26 01:46
14F：→ dennissnake: 那請問有人看過sirt1跑膠結果分子量是110的相關paper 03/29 22:18
15F：→ dennissnake: 嗎 我也覺得我做的是對的 想拿出證據給老師瞧瞧XD 03/29 22:18