作者peterjfs (幾家歡樂幾家愁)
看板Biotech
標題[求救] 最近細胞狀況不好
時間Mon Mar 23 22:18:02 2015
各位板上的生科前輩
小弟最近養細胞遇到一些問題~想請問各位大大是否遇過
過年前將自己正在養的細胞株 SW1353 凍起來
代數大概是p60
過完年後回實驗室~~~就開始解凍細胞作實驗
狀況是這樣的：
凍細胞使用5% DMSO 跟 95%的FBS
解凍時直接將細胞置於37度C水浴，解凍後將細胞直接加入medium中
待細胞貼盤後(大約6~8小時)將medium吸除，給予10% FBS新鮮的medium
第二天觀察細胞時，細胞狀況都不錯
第三天觀察細胞時，細胞全都漂起來.....
medium沒有汙染的狀況，可是細胞都漂起來，試過好多隻細胞也都是這種情形
想請問各位前輩們是否有遇過相同情形，不知道該如何解決
目前已排除PBS Tryple medium汙染 (因為小弟全換過新的了)
最近都有看細胞恐懼症. ....細胞養了5年第一次碰到這種情形>"<
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1F：→ roy047: incubator是好的嗎?@@ 03/23 22:44
2F：→ peterjfs: 恩~~~只有我有問題QQ 03/23 23:22
3F：→ zoe77101y: 建議可以解凍完 03/24 00:24
4F：→ zoe77101y: 離心細胞，馬上去除DMSO試看看 03/24 00:24
5F：→ zoe77101y: 另外，6-8小時後，有觀察到懸浮物有多嗎？？ 03/24 00:24
6F：→ lail: 先請別人幫你解，確定活了再給你養 03/24 07:16
7F：→ homeshawn: 其實。。我懷疑你當初凍細胞有汙染。。。。 03/25 11:42
8F：→ homeshawn: 可以染個hoechst看看 @___@ 03/25 11:44
9F：推 shinuy: 覺得凍細胞前細胞已有問題+1 03/25 15:07